اثر اسیدسیتریک بر توان زیستی و القای آپوپتوز در رده سلولیآدنوکارسینومای کولورکتال انسان ht-29

زمینه و هدف: آدنوکارسینومای کولورکتال به علت پاسخ ضعیف مبتلایان به درمان‌های رایج، یکی از علل شایع مرگ و میر می‌باشد. در این مطالعه اثر اسیدسیتریک بر توان زیستی و میزان وقوع آپوپتوز در رده سلولی آدنوکارسینومای کولورکتال انسان (ht29) بررسی شده است. اسیدسیتریک یک اسید آلی طبیعی است که عموما در عصاره‌ی مرکبات یافت می‌شود و به‌عنوان یک مهارکننده‌ی فیزیولوژیکی آنزیم‌های دخیل در مسیر گلیکولیز، در راستای حذف سلول‌های سرطانی مورد توجه می‌باشد.روش بررسی: در این مطالعه سلول‌های سرطانی کولورکتال رده‌ی ht29 در محیط کشت dmem با 10 درصد سرم جنین گاوی کشت داده شدند. سلول‌ها در غلظت‌های 400، 800 و 1600 میکروگرم/میلی‌لیتر اسیدسیتریک تیمار شدند و برای مدت زمان‌ 24، 48 و 72 ساعت انکوبه گردیدند. میزان رشد سلولی با روش رنگ‌سنجی mts بررسی شد، میزان القا آپوپتوز به وسیله‌ی دستگاه فلوسیتومتری با کیت آنکسینپروپیدیوم یدید (annexinpi) طبق دستورالعمل کیت در هر سه زمان انکوباسیون بررسی گردید.یافته‌ها: نتایج بررسی توان زیستی سلول‌های رده‌ی ht29 تیمار‌شده با غلظت‌های مختلف اسید‌سیتریک(400، 800 و 1600 میکروگرم/میلی‌لیتر)، بعد از گذشت زمان‌های سه‌گانه‌ی انکوباسیون(24، 48 و 72 ساعت) با استفاده از تست mts حاکی از آن است که توان زیستی سلول‌های رده‌ی ht29 در تمام غلظت‌های اسیدسیتریک به‌صورت وابسته به دوز و زمان کاهش می‌یابد. همچنین نتایج القای آپوپتوز در رده سلولی ht29 تیمار شده با غلظت‌های مختلف اسیدسیتریک(400، 800 و 1600 میکروگرم/میلی‌لیتر)، بعد از گذشت زمان‌های سه‌گانه‌ی انکوباسیون(24، 48 و 72 ساعت) با استفاده از تست annexin vfitc، نشان می‌دهد که درصد سلول‌هایی که در مرحله‌ی ابتدایی و انتهایی آپوپتوز هستند با افزایش غلظت اسیدسیتریک و طول زمان انکوباسیون افزایش یافته‌اند، که این افزایش درصد آپوپتوز نیز نسبت به گروه کنترل در هر سه زمان 24، 48 و 72 ساعت قابل ملاحظه می‌باشد.نتیجه‌گیری: نتایج بیان می‌کنند که اسیدسیتریک قادر است از طریق القای مسیر آپوپتوزی توان زیستی سلول‌های آدنوکارسینومای کولورکتال را کاهش دهد.

Effect of citric acid on Bioavailability and apoptosis induction in human colorectal Adenocarcinoma cell line (HT29)

Background and Aim: Colorectal adenocarcinoma is one of the common causes of death due to weak response to common therapies. In this study, the effect of citric acid on bioavailability and apoptosis of the human colorectal adenocarcinoma cell line (HT29) was examined. Citric acid is a naturally organic acid that commonly found in citrus and is considered as a physiological inhibitor of enzymes involved in glycolysis pathway to remove cancer cells.Materials and Methods: In this study, HT29 colorectal adenocarcinoma cancer cells were cultured in DMEM medium with 10% bovine serum. The cells were treated in 400, 800 and 1600 mu;g/ml concentrations of citric acid and incubated at 24, 48 and 72 hours respectively. Cell growth was analyzed by MTS kit and apoptosis was analyzed three times by flow cytometry using an Annexin VFITC/PI kit according to the manufacturers protocol.Results: The results of bioavailability of treated HT29 cells with different concentrations (400, 800 and 1600 mu;g/ml) of citric acid, after trinary incubation time (24, 48 and 72 hours) using the MTS assay showed that, bioavailability of HT29 cell line decreased at all concentrations of citric acid in a time dependent manner. Also, the results of the apoptosis induction in treated HT29 cell line with different concentrations (400, 800 and 1600 mu;g/ml) of citric acid, after trinary incubation time (24, 48 and 72 hours) using Annexin VFITC/PI test showed that the percentage of the early and late apoptosis cells increased with increasing citric acid concentration and incubation time, which increased the percentage of apoptosis compared to the control group is significant in all three times of 24, 48 and 72 hours.Conclusion: The results indicate that citric acid can reduce the bioavailability of colorectal adenocarcinoma cells by inducing apoptosis pathway.