القای آپوپتوز در رده سلولی آدنوکارسینومای کولورکتال انسان و مهار رشد برخی پاتوژن‌های گوارشی با استفاده از متابولیت‌های لاکتوباسیلوس ساکئی

زمینه و هدف: لاکتوباسیل‌ها از مهم‌ترین جنس‌های باکتری‌های اسید لاکتیک محسوب می‌شوند و استفاده از بعضی گونه‌های آن با توان پروبیوتیک می‌تواند در جلوگیری از رشد بعضی میکروارگانیسم‌های بیماری‌زا و کنترل بیماری‌ها و سرطان‌های گوارشی موثر باشد. در مطالعه‌ی حاضر اثرات پروآپوپتوزی و ضدباکتریایی لاکتوباسیلوس ساکئی بر رده سلولی آدنوکارسینومای کولورکتال انسان و برخی پاتوژن‌های گوارشی بررسی گردید.روش بررسی: در تحقیق حاضر، اثر ضدباکتریایی متابولیت‌های کشت باکتری‌های لاکتوباسیلوس ساکئی علیه باکتری‌های بیمار‌ی‌زای گوارشی به کمک روش چاهک بررسی گردید و قطر هاله عدم‌رشد ایجاد شده توسط ساکئی علیه هریک از باکتری‌های بیماری‌زا، اندازه‌گیری شد. با کشت رده سلولی (ht29) در محیط کشت dmem محتوی 10 درصد سرم جنین گاوی و تیمار سلول‌ها در غلظت‌های 5، 10، 15 و 20 میلی‌گرم/ میلی‌لیتر از متابولیت‌های ساکئی و انکوبه شدن در زمان‌ 24 و 48 ساعت، میزان القای آپوپتوز با استفاده از کیت آنکسینپروپیدیوم یدید (annexinpi) طبق دستورالعمل کیت در هر دو زمان انکوباسیون مورد بررسی قرار گرفت. به منظور کاهش خطا، آزمون‌ها با سه بار تکرار انجام گرفت. یافته ها: نتایج حاصل از این تحقیق حاکی از آن است که ساکئی قادر به تولید متابولیت‌های مقابله‌کننده با باکتری‌های بیماری‌زای گوارشی می‌باشد. نتایج تست انکسین نیز نشان ‌داد که با افزایش غلظت متابولیت‌ها، القای آپوپتوز در این رده‌ی سلولی (ht29) به‌صورت وابسته به دوز افزایش می‌یابد(0/05>p).نتیجه‌گیری: به‌نظر می‌رسد که زمینه‌ی تحقیقاتی مناسبی برای بهره‌برداری از ترکیبات فعال زیستی تولیدشده توسط لاکتوباسیلوس ساکئی در کنترل و مقابله با باکتری‌های بیمار‌ی‌زای گوارشی و درمان آدنوکارسینومای کولورکتال وجود داشته باشد.

Apoptotic induction in human colorectal adenocarcinoma cell line and growth inhibition of some gastrointestinal pathogenic species by Lactobacillus sakei metabolites

Background and Aim: Lactobacillus is the most important genus of lactic acid bacteria and the use of some species of lactobacillus with the probiotic potential can be effective for inhibition of the growth of some pathogens and control of gastrointestinal diseases and cancers. In this study, the proapoptotic and antimicrobial effect of Lactobacillus sakei on human colorectal adenocarcinoma cell line and some gastrointestinal pathogenic species was examined. Materials and Methods: In this study, the antimicrobial activity of metabolites of Lactobacillus sakei was assessed by Well Diffusion Agar(WDA) method against some gastrointestinal pathogenic bacteria. HT29 colorectal adenocarcinoma cancer cells were cultured in DMEM medium with 10% bovine serum. The cells were treated in 5, 10, 15 and 20 mg/ml concentrations of sakei metabolites and incubated at 24 and 48 hours. Apoptosis was analyzed by Annexin VFITC/PI kit according to the manufacturers protocol in both incubation times. For error reduction, each test was performed in triplicateResults: The results of this study indicate that sakei was able to produce antimicrobial metabolites against gastrointestinal pathogenic bacteria. Also, the results of the Annexin test showed that with increasing concentration of sakei metabolites in dose dependent manner, induction of apoptosis in this cell line increases(p<0.05).Conclusion: It seems that there is a good research field for the use of bioactive compounds produced by Lactobacillus sakei in the control of gastrointestinal pathogenic bacteria and treatment of human colorectal adenocarcinoma.