|
|
|
|
dual promoter vector construction for simultaneous gene expression using spliced overlap extension by polymerase chain reaction (soepcr) technique
|
|
|
|
|
|
|
|
نویسنده
|
sekhavati m.h. ,tahmoorespur m. ,abbassi-daloii t. ,yousefi s. ,khabiri a.a. ,akbari r. ,shekari e.
|
|
منبع
|
iranian journal of applied animal science - 2015 - دوره : 5 - شماره : 4 - صفحه:853 -858
|
|
چکیده
|
There are two different coexpression systems including bicistronic; dualvector or twopromoter to express two different genes simultaneously and also to study proteinprotein interactions. bicistronic system has disadvantages e.g. compared with twopromoter system. in this paper, a simple method based on spliced overlap extension by polymerase chain reaction (soepcr) technique was demonstrated for construction of twopromoter vector to express two genes equally. to construct twopromoter vector, two pairs of megaprimer containing enzymatic restriction sites, t7 promoter, lac operator and ribosome binding site (rbs) sequences were used in soepcr. the constructed vector can be used in order to coexpression of other genes properly in a variety of bacterial expression hosts.
|
|
کلیدواژه
|
coexpression ,proteinprotein interactions ,soepcr ,twopromoter vector
|
|
آدرس
|
ferdowsi university of mashhad, faculty of agriculture, department of animal science, ایران, ferdowsi university of mashhad, faculty of agriculture, department of animal science, ایران, ferdowsi university of mashhad, faculty of agriculture, department of animal science, ایران, ferdowsi university of mashhad, faculty of agriculture, department of animal science, ایران, ferdowsi university of mashhad, faculty of agriculture, department of animal science, ایران, ferdowsi university of mashhad, faculty of agriculture, department of animal science, ایران, ferdowsi university of mashhad, faculty of agriculture, department of animal science, ایران
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
ساخت وکتور با دو پروموتور برای بیان همزمان دو ژن با استفاده از تکنیک SOEPCR
|
|
|
|
|
Authors
|
سخاوتی م.ه. ,طهمورثپور م. ,عباسی-دلوئی ط. ,یوسفی س. ,خبیری ع.ا. ,اکبری ر. ,شکاری ع
|
|
Abstract
|
سه سیستم مختلف شامل بیسیسترونیک، dualvector و وکتور با دو پروموتور برای بیان همزمان دو پروتئین مختلف و همچنین بررسی اثر متقابل آنها وجود دارد. سیستمهای بیسیسترونیک و dualvector در مقایسه با سیستم وکتور با دو پروموتور معایبی دارند. در این مقاله روش سادهای بر اساس تکنیک SOEPCR برای ساخت یک وکتور با دو پروموتور توضیح داده شده است. این وکتور میتواند برای بیان همزمان پروتئینهای Omp25 و Omp31 به عنوان دو آنتی ژن عمده بروسلا ملیتنسیس، استفاده شود. برای ساخت وکتور با دو پروموتور، دو جفت مگاپرایمر دارای توالی جایگاههای محدودالاثر آنزیمی، پروموتور T7، اپران لک و جایگاه اتصال ریبوزوم (RBS)، در SOEPCR مورد استفاده قرار گرفتند. وکتور ساخته شده در این مطالعه میتواند برای بیان همزمان ژنهای دیگر در میزبانهای بیانی باکتریایی گوناگونی استفاده گردد
|
|
Keywords
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|