|
|
|
|
production of monoclonal antibody against prokaryotically expressed g1 protein of bovine ephemeral fever virus
|
|
|
|
|
|
|
|
نویسنده
|
pasandideh r. ,seyfi abad shapouri m.r. ,beigi nassiri m.t.
|
|
منبع
|
iranian journal of applied animal science - 2019 - دوره : 9 - شماره : 1 - صفحه:51 -57
|
|
چکیده
|
Epitope-g1 of bovine ephemeral fever virus (befv) g glycoprotein has been genetically and antigenically conserved among various isolates of befv and only reacts with anti-befv neutralising antibodies. therefore, it is a candidate antigen for development of the enzyme linked immunosorbent assay (elisa) for se-rological identification bovine ephemeral fever (bef)-infected animals. the aim of this study was to pro-duce a monoclonal antibody (mab) against recombinant g1 antigen expressed into escherichia coli. for this purpose, somatic cell hybrids between sp2/0 myeloma cells and spleen cells derived from balb/c mice immunized with maltose-binding protein (mbp)-g1 fusion protein were established. after three rounds of cloning, the stability of antibody secretion in the positive clones was confirmed by elisa and the reactivity of the mabs against recombinant g1 was verified by western blot analysis. the specific mabs produced against recombinant g1 antigen in this study could be used for establishing befv diagnostic experiments in the future.
|
|
کلیدواژه
|
bovine ephemeral fever virus ,hybridoma ,monoclonal antibody ,recombinant g1 protein
|
|
آدرس
|
khuzestan agricultural science and natural resources university, faculty of animal and food science, department of animal science, iran, shahid chamran university of ahvaz, faculty of veterinary medicine, department of pathobiology, iran, khuzestan agricultural science and natural resources university, faculty of animal and food science, department of animal science, iran
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
تولید آنتی بادی مونوکلونال علیه پروتئین G1 بیان شده پروکاریوتی از ویروس تب بیدوام گاوی
|
|
|
|
|
Authors
|
پسندیده ر. ,صیفی آباد شاپوری م.ر. ,بیگی نصیری م.ت.
|
|
Abstract
|
اپیتوپ G1 از گلیکوپروتئین G ویروس تب بی دوام گاوی (BEFV) از لحاظ ژنتیکی و آنتی ژنیکی در بین جدایه های مختلف از این ویروس حفاظت شده است و تنها با آنتی بادی های خنثی کننده ضد این ویروس واکنش می دهد. بنابراین این آنتیژن، یک نامزد مناسب برای توسعه آزمون ایمونوسوربنت متصل به آنزیم (ELISA) برای شناسایی سرولوژیکی حیوانات آلوده است. هدف از این مطالعه، تولید آنتی بادی مونوکلونال علیه آنتیژن G1 نوترکیب بیان شده در اشرشیاکلی بود. به این منظور، هیبریدهای سلولی سوماتیک بین سلول های میلومای SP2/0 و سلول های طحال حاصل از موش های Balb/c ایمن شده با پروتئین هم جوش MBPG1 ایجاد شد. پس از سه مرتبه کلونینگ، پایداری ترشح آنتی بادی درکلون های مثبت با روش الایزا و واکنش آنتی بادی های مونوکلونال علیه G1 نوترکیب توسط آزمایش وسترن بلات تأیید شد. آنتی بادی های اختصاصی تولید شده علیه آنتی ژن نوترکیب G1 ممکن است به منظور طراحی آزمایش های تشخیصی برای ویروس BEF در آینده مناسب باشند.
|
|
Keywords
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|