Control of in Vitro Contamination in Dionysia Tapetodes For Effective Micropropagation

In vitro microbial contaminations are the most serious problems in plant tissue culture. initial attempts for micropropagation of dionysia tapetodes, a beautiful alpine cushion plant from northeast iran, led to 100% explants contamination. hence, the present study was conducted to develop an efficient surface sterilization protocol for in vitro culture of field collected d. tapetodes using combinations of different disinfection agents including sodium hypochlorite (naocl), ethanol and mercuric chloride (hgcl2) in different concentrations and exposure times. the most effective sterilization treatment with 91.6% healthy explants was the application of 0.1% mercuric chloride for 4 min. however, mercuric chloride in higher concentration (0.2%) was toxic to explants tissues and resulted in 41.66% necrosis. moreover, the results indicated that in spite of being a general disinfectant in tissue culture studies, naocl was not as effective as mercuric chloride in elimination of microbial contaminations and led to 75% total infection when used in concentration of 3% for 15 min. the current experiment represented a potential method for disinfection of d. tapetodes and provided aseptic and clean explants for future in vitro culture studies.

کنترل آلودگی های درون شیشه ای Dionysia tapetodes به منظور ارائه روش بهینه ریزازدیادی این گیاه

آلودگی­های میکروبی درون شیشه­ای، یکی از  مهمترین مشکلات در فرایندکشت بافت گیاهان می­باشند. تلاش­های اولیه جهت ریزازدیادی Dionysia tapetodes که یک گیاه زیبای بالشتکی صخره­ای در شمال شرق ایران می­باشد، منجر به صد درصد آلودگی ریزنمونه­ها گردید. از این رو مطالعه حاضر به منظور ارائه پروتکل مؤثر ضدعفونی سطحی ریزنمونه­های گیاه دیونیزیا با استفاده از مواد ضدعفونی کننده مختلف  مانند هیپوکلریت سدیم، اتانول و کلرید جیوه در غلظت­ها و زمان­های مختلف صورت گرفت. مؤثرترین روش ضدعفونی که منجر به دستیابی به 6/91 درصد ریزنمونه­های سالم گردید با استفاده از کلرید جیوه  با غلظت 1/0 درصد به مدت 4 دقیقه بدست آمد، البته این ماده در غلظت­های بالاتر ( 2/0 درصد) برای بافت­های گیاه حالت سمیت نشان داد و منجر به نکروزه شدن بافت ریزنمونه­ها به میزان 66/41  درصد گردید. همچنین علی­رغم اینکه هیپوکلریت سدیم به عنوان یک ماده ضدعفونی کننده عمومی در کشت بافت شناخته شده است، این ماده به اندازه کلرید جیوه در حذف آلودگی­های میکروبی در ریزنمونه­های گیاه دیونیزیا مؤثر نبود و استفاده از آن در غلظت 3 درصد و به مدت 15 دقیقه در فرایند ضدعفونی باعث بروز 75 درصد آلودگی میکروبی در ریزنمونه­ها شد. در مجموع در مطالعه حاضر یک روش بهینه جهت ضدعفونی ریزنمونه های D. tapetodes و دسترسی به گیاهان عاری از بیماری این گیاه ارائه گردید که این امر می­تواند فرایند ریزازدیادی گیاه دیونیزیا را در آینده تسهیل نماید.