کلونینگ ژن اتولیزین ماینور استرپتوکوکوس پنومونیه

چکیده زمینه و هدف: امروزه افزایش سویه‌های مقاوم به آنتی‌بیوتیک و ناکارآمد بودن واکسن‌های موجود برای پیشگیری از عفونت‌های پنوموکوکی ضرورت بررسی آنتی‌ژن‌های جدید پروتئینی را مشخص می‌کند. به نظر می رسد اتولیزین ماینور استرپتوکوکوس پنومونیه دارای خواص آنتی ژنیک می باشد. در این مطالعه برای اولین بار ژن آن کلون گردید. روش بررسی: پس از استخراج ژنوم سویه استاندارد استرپتوکوکوس پنومونیه (atcc 49619) آغازگرهای اختصاصی به منظور تکثیر ژن اتولیزین ماینور با روش pcr طراحی شدند. قطعه ژن تکثیر شده پس از تخلیص به درون وکتورpet21a الحاق و با شوک حرارتی به درون سلول مستعد باکتریایی منتقل شد. وجود ژن در وکتور نوترکیب و عدم بروز جهش در آن با روش‌های هضم آنزیمی و تعیین توالی مورد بررسی قرار گرفت. این ژن در نهایت به روش بیوانفورماتیک مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. یافته‌ها: قطعه ژن اتولیزین ماینور با موفقیت کلون شد و نتایج هضم آنزیمی نشان‌دهنده جداسازی کامل این ژن از پلاسمید بود. بررسی‌های بیوانفورماتیک نشان داد که این ژن فاقد سیگنال پپتید بوده و پروتئینی به وزن ملکولی 44/36 کیلودالتون دارای 318 اسیدآمینه را کد می کند. نتیجه‌گیری: معرفی آنتی‌ژن‌های جدید نظیر اتولیزین ماینور و تعیین ویژگی های آنها مسیرهای بیش‌تری را در جهت پیش‌گیری و کنترل عفونت های ناشی از استرپتوکوکوس پنومونیه باز خواهد کرد. واژه های کلیدی: استرپتوکوکوس پنومونیه، اتولیزین ماینور، کلونینگ