|
|
|
|
جداسازی، همسانه‌سازی و توصیف ملکولی ژن‌های رمزکننده آنزیم‌های اندونوکلیاز اختصاصی تک‌رشته از گیاه جعفری (Petroselinum crispum L.)
|
|
|
|
|
|
|
|
نویسنده
|
ذوالعلی جعفر ,میرزایی مهدیه ,شالوزاد آناهیت
|
|
منبع
|
بيوتكنولوژي كشاورزي - 1394 - دوره : 7 - شماره : 1 - صفحه:201 -215
|
|
چکیده
|
نوکلیازهای اختصاصی تک‌رشته (خانواده s1/p1)، بطور گسترده در تحقیقات ژنتیک مولکولی مورد استفاده قرار می گیرند. پرکاربردترین آنزیم های این خانواده، اندونوکلیازهای گیاهی هستند که از قابلیت برش اختصاصی نواحی جفت شدگی ناجور در مولکول های dna هترودوپلکس برخوردارند. تکنیک هضم آنزیمی dna هترودوپلکس مبتنی بر فعالیت این اندونوکلیازها، یکی از متداول‌ترین تکنیک‌های مورد استفاده برای شناسایی جهش‌های نقطه‌ای در ژنوم است. در این تحقیق، توالی‌های ژنی رمزکننده آنزیم‌های اندونوکلیاز اختصاصی تک‌رشته از گیاه جعفری (petroselinum crispum) با استفاده از آغازگرهای هترولوگ در واکنش pcr جداسازی گردیدند. توالی های ژنی جداسازی شده، پس از همسانه سازی و تعیین ماهیت، به نام‌های pars i و pars ii نامگذاری شدند. مطالعه نرم‌افزاری خصوصیات فیزیکوشیمیایی، ساختار مولکولی و قرابت ژنتیکی نشان داد که دو آنزیم pars i و pars ii به خانواده نوکلیازهای s1/p1 تعلق داشته و شباهت زیادی به نوکلیازهای اختصاصی dna هترودوپلکس نشان می‌دهند. با این حال، تعیین مکانیزم فعالیت و ترجیح سوبسترایی این نوکلیازها، مستلزم بررسی فعالیت نمونه خالص طبیعی یا نوترکیب آنها بر روی سوبسترای dna هترودوپلکس می باشد.
|
|
کلیدواژه
|
نوکلیازهای اختصاصی تک‌رشته ,جعفری ,هضم آنزیمی DNA هترودوپلکس ,همسانه‌سازی
|
|
آدرس
|
دانشگاه شهید باهنر کرمان, استادیار گروه بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید باهنر کرمان, ایران, دانشگاه شهید باهنر کرمان, دانش‌آموخته بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید باهنر کرمان, ایران, دانشگاه شهید باهنر کرمان, دانش‌آموخته بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید باهنر کرمان, ایران
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Authors
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|