تاثیر افزودن مکمل آلی روی-متیونین و مکمل نمک کلسیمی روغن کتان بر بیان ژ‌‌ن‌igf-1 در بافت کبد بره‌های نر پرواری

هدف: عنصر روی یکی از محدودکننده‌ترین ریزعناصر معدنی است که برای رشد بدن، ساختمان و فعالیت هورمونی و آنزیمی، سوخت ‌و ساز مواد مغذی، تقسیم سلولی و سیستم ایمنی مورد نیاز است. مشخص شده که کمبود روی با کاهش مصرف غذا، کاهش رشد و کاهش تولید igf-1 در کبد همراه است. عنصر روی یکی از عوامل مهم در تنظیم بیان ژن خانواده igf در بسیاری از بافت ها است. همچنین عنصر روی بر غیر اشباع‌سازی اسید لینولئیک موثر است. عنصر روی می‌تواند از پراکسیداسیون لیپیدها جلوگیری کند. به طور کلی ارتباط قابل توجهی بین متابولیسم چربی و عنصر روی وجود دارد. از طرف دیگر روغن کتان حاوی اسیدچرب ضروری آلفالینولینک اسید (امگا3) است که به نظر می‌رسد با عملکردهای igf-1 در بدن مرتبط باشد. لذا در این پژوهش تاثیر افزودن مکمل آلی روی-متیونین به جیره‌های با و بدون مکمل نمک کلسیمی روغن کتان بر بیان ژن‌ igf-1 در بافت کبد بره های نر پرواری مورد بررسی قرار گرفت.مواد و روش ها: در این پژوهش از 44 راس بره نر عربی با آزمایش فاکتوریل 2*2 در قالب طرح کاملا تصادفی با چهار تیمار و 11 تکرار استفاده شد. چهار جیره‌ی آزمایشی عبارت بودند 1) جیره پایه بدون مکمل نمک کلسیمی روغن کتان و بدون مکمل روی- متیونین (کنترل)، 2) جیره پایه بدون مکمل کلسیمی روغن کتان حاوی 0.08 درصد مکمل روی- متیونین (معادل 100 میلی‌گرم روی در کیلوگرم ماده خشک، 3) جیره پایه حاوی 3 درصد مکمل نمک کلسیمی روغن کتان بدون مکمل روی-متیونین ، 4) جیره پایه حاوی 3 درصد مکمل نمک کلسیمی روغن کتان بعلاوه 0.08 درصد مکمل روی-متیونین. پس از پایان دوره پروار 3 راس گوسفند از هر تیمار کشتار گردید و بافت کبد همراه با ازت مایع به آزمایشگاه منتقل شد. پس از استخراج rna و اندازه‌گیری کیفیت آن، سنتز cdna انجام شد. در نهایت میزان بیان ژن igf-1 با استفاده از روش real time pcr مورد ارزیابی قرار گرفت.نتایج: مشاهده تک باند در محدوده‌ی 240 جفت نوکلئوتید برای ژن igf-1 و در محدوده‌ی 144 جفت نوکلئوتید برای ژن gapdh بر روی الکتروفورز ژل، بیانگر صحت انجام آزمایش و تکثیر قطعه‌ی مورد نظر بوسیله واکنش زنجیره‌ای پلیمراز بود. حضور تنها یک قله در منحنی‌های ذوب ژن igf-1 و gapdh در واکنش real time pcr تولید یک محصول اختصاصی در این واکنش را تایید کرد. نتایج حاصل از این پژوهش نشان داد، افزودن مکمل روی منجر به افزایش معنی‌دار بیان ژن igf-1 شده (0.01 >p)، به طوری که از 1 به 4.95 رسیده است. همچنین اثر افزودن مکمل چربی نمک کلسیمی روغن کتان بر بیان ژن igf-1 معنی دار یوده (0.01 >p) به طوری که از 1 به 3.52 رسیده است. اثرات متقابل مکمل روی- متیونین و مکمل چربی نمک کلسیمی روغن کتان معنی‌دار نشد. افزودن همزمان مکمل روی- متیونین و مکمل چربی نمک کلسیمی روغن کتان به جیره بره‌های پرواری سبب افزایش بیان ژن igf-1 در کبد می‌گردد.نتیجه گیری: افزودن مکمل آلی روی-متیونین به جیره‌های حاوی مکمل چربی نمک کلسیمی روغن کتان سبب افزایش بیان ژن‌ igf-1 می‌گردد. افزایش بیان ژن‌ igf-1 در کبد احتمالا منجر به افزایش رشد و در نهایت تولید دام خواهد شد.

effect of zinc-methionine organic and ca-salt of flaxseed oil supplement on igf-1 gene expression in liver tissue of fattening male lambs

objectivezinc is one of the most limiting trace mineral elements required for body growth, structure, hormonal and enzyme activity, nutrient metabolism, cell division, and immune system function. zinc deficiency has been associated with reduced food intake, stunted growth, and decreased production of igf-1 in the liver. zinc plays a key role in the regulation of igf family gene expression in various tissues and is also effective in desaturating linoleic acid, thereby preventing lipid peroxidation. there is a significant relationship between fat metabolism and zinc. on the other hand, flaxseed oil contains the essential fatty acid alpha-linolenic acid (omega-3), which appears to be related to igf-1 function in the body. therefore, this research investigated the effect of adding a zinc-methionine organic supplement to diets with and without the calcium salt of flaxseed oil on igf-1 gene expression in the liver tissue of fattening lambs.materials and methodsin this research, 44 arab male lambs were used in a 2 x 2 factorial experiment within a completely randomized design, with four treatments and 11 replications. the four experimental diets were: 1) basic diet without ca-salt of flaxseed oil supplement and without zinc-methionine supplement (con), 2) basic diet without ca-salt of flaxseed oil supplement containing 0.08% zinc-methionine supplement, 3) basic diet containing 3% ca-salt of flaxseed oil supplement without zinc-methionine supplement, and 4) basic diet containing 3% ca-salt of flaxseed oil supplement plus 0.08% zinc-methionine supplement. after the fattening period, three lambs from each treatment were slaughtered, and muscle tissue was transferred to the laboratory with liquid nitrogen. after rna extraction and quality assessment, cdna synthesis was performed. the expression of lipogenic genes was evaluated using the real-time pcr method.resultsthe presence of a single band in the range of 240 base pairs for the igf-1 gene and 144 base pairs for the gapdh gene on gel electrophoresis confirmed the accuracy of the test and the correct amplification of the desired fragments by polymerase chain reaction. the presence of a single peak in the melting curves of the igf-1 and gapdh genes in the real-time pcr reaction further confirmed the specificity of the produced products. the results showed that the addition of zinc supplements significantly increased the expression of the igf-1 gene (p < 0.01), from 1 to 4.95. additionally, the calcium salt of flaxseed oil supplement significantly increased igf-1 gene expression (p < 0.01), raising it from 1 to 3.52. the interaction effects of the zinc-methionine supplement and calcium salt flax oil supplement were not significant. simultaneous addition of the zinc-methionine supplement and the calcium salt flax oil supplement to the diet of fattening lambs increased igf-1 gene expression in the liver.conclusionsthe addition of a zinc-methionine organic supplement to diets containing a calcium salt flaxseed oil supplement increases igf-1 gene expression. increasing igf-1 gene expression will likely enhance growth and overall production.