رونویسی غیر متعارف cDNA ژن فعال کننده پلاسمینوژن انسانی (t-PA) در گیاهان تراریخت توتون

پروتیین rt-pa یک عامل اختصاصی فیبرین است که موجب حل کردن لخته های خونی و جلوگیری از سکته های قلبی و مغزی می گردد. این پروتیین به فرم دارویی در میزبانهای مختلف بصورت نوترکیب تولید شده است. هدف از این طرح بررسی بیان آن در گیاهان توتون تراریخت بودکه در آن مورد جالبی از نحوه رونویسی ژن در گیاهان تراریخت مشاهده گردید. رونویسی ژن با استفاده از آغازگرهای اختصاصی به روش rt-pcr انجام گرفت. نتایج روی الکتروفرز ژل آگارز 8/0 درصد نشان داد که علاوه بر نوار اختصاصی t-pa (1.7 kb) یک محصول غیر منتظره دیگر به طولbp 650 هم در گیاهان تراریخت تکثیر می شد. پس از بازیابی آن قطعه از ژل و توالی یابی، مشخص شد که این محصول اضافی با cdna مربوط به ژن t-pa 99% همولوژی دارد. به عبارت دیگر این باند اضافی دارای بخشی از توالی cdnaی ژن t-pa می باشد. در ادامه توالی قطعه اضافی با نرم افزار megalign با توالی cdna ژن t-pa همردیف شد تا نواحی همپوشان و نیز نواحی حذف شده از این قطعه مشخص شود. در نهایت از پایگاه اطلاعاتی cdd موجود در ncbi جهت مشخص کردن دامنه های حذف شده و باقی مانده استفاده شد. نتایج این بررسی نشان داد که توالی مربوط به دامنه کرینگل ها حذف و توالی مربوط به دامنه سرین پروتیازی آن باقی مانده است. از طرفی این دمین سرین پروتیازی می باشد که کار اصلی t-pa را انجام می دهد به گونه ای که مهندسین ژنتیک در تلاش برای تولید پروتیینی از t-pa می باشند که فقط دارای همین دمین پروتیازی باشد. در حالی که در اینجا گیاه این کار مهندسی را به صورت طبیعی انجام می دهد. این نتایج احتمالاً به علت پردازش متغیر rna می باشد.کلمات کلیدی: توتون تراریخت، دمین، کرینگل و t-pa نوترکیب.