بررسی و مقایسه خصوصیات بیوشیمیایی، ساختار مولکولی و روند تکامل ژنتیکی دو آیزوفرم تیوردوکسین نوع h از گیاه انگور عسکری (Vitis vinifera L. cv. Askari)

تیوردوکسین ها (trxs) پروتیین هایی کوچک و مقاوم در برابر حرارت هستند که در واکنش های تبادلی دی تیول/دی سولفید شرکت می کنند. در مقایسه با سایر موجودات زنده، گیاهان حاوی شش نوع تیوردوکسین مختلف شامل f، h، m، o، x و y می باشند که تیوردوکسین نوع h با داشتن اشکال چندگانه، در فرآیندهای مختلفی همچون محافظت سلول در برابر تنش اکسیداتیو و تنش های زنده و غیرزنده دخالت دارد. دو ژن تیوردوکسین نوع h، تحت عناوین vvtrxh4 و vvcxxs2، از بافت حبه گیاه انگور عسکری (vitis vinifera l. cv. askari) با استفاده از روش واکنش زنجیره ای پلی مراز با نسخه برداری معکوس (rt-pcr) جداسازی و در ناقل پلاسمیدی puc19 همسانه سازی شده و خصوصیات بیوشیمیایی، ساختار مولکولی و روند تکامل ژنتیکی آن ها مورد بررسی و مقایسه قرار گرفت. بررسی توالی نوکلیوتیدی نشان داد که چارچوب خواندنی ژن های همسانه سازی شده vvtrxh4 و vvcxxs2 به ترتیب bp345 و bp 381 طول داشته و پروتیین هایی با 114 و 126 اسیدآمینه را کد می کنند. بررسی توالی پروتیینی نشان داد که ژن vvtrxh4 دارای جایگاه فعال معمول wcgpc بوده، در حالی که جایگاه فعال ژن vvcxxs2 به صورت غیرمعمول و به شکل wcips می باشد. وزن مولکولی محاسبه شده و نقطه آیزوالکتریک پیش بینی شده پروتیین vvtrxh4 به ترتیب برابر 76/12 کیلودالتون و 22/5 و پروتیین vvcxxs2 به ترتیب برابر 25/14 کیلودالتون و 68/4 می باشد. بررسی های ساختاری نشان داد که پروتیین های بدست آمده از نظر ساختار سه بعدی مشابه می باشند. در حالی که بررسی های فیلوژنتیکی ژن های همسانه سازی شده با تیوردوکسین های سایر گیاهان نشان داد که این ژن ها متعلق به زیرگروه های متفاوت می باشند. در این تحقیق ژن vvtrxh4 متعلق به کلاس a از زیرگروه i بوده، اما ژن vvcxxs2 به کلاس b از زیرگروه iii تیوردوکسین های نوع h تعلق دارد.