انگشت‌نگاری ‏dna‏ در اکوتیپ‌های سه گونه گل‌ختمی با استفاده از نشانگر مولکولی ‏issr

هدف: گل‌ختمی گیاهی دارویی از خانواده پنیرکmalvaceae ) ‎‏ ‏‎ (‎و متعلق به جنس‎ althaea ‎می‌باشد. آگاهی از تنوع‌ژنتیکی اساس ‏به‌نژادی‌گیاهی است و از جنبه‌های مختلف مانند انتخاب والدین تلاقی، حفاظت از ژرم‌پلاسم و جلوگیری از فرسایش‌ژنتیکی دارای اهمیت ‏است. هدف از انجام این تحقیق ارزیابی تنوع‌ژنتیکی و بررسی روابط‌ژنتیکی در اکوتیپ‌های بومی گل‌ختمی ایران به منظور استفاده در ‏پروژه‌های به‌نژادی و حفاظت از ذخایر‌ژنتیکی این گیاه بود.‏مواد و روش‌ها: در این تحقیق پس از استخراج ‏dna‏ از برگ‌های جوان به روش ‏ctab، تنوع مولکولی 18 اکوتیپ از سه گونه ‏گل‌ختمی‎ (althaea sp.)‎‏ با استفاده از 10 آغازگر‎ issr ‎مورد بررسی قرار گرفت.‏نتایج: میزان تعداد کل نوارهای تشکیل شده توسط آغازگرهای مورد مطالعه بین 11 تا 23 برای هر آغازگر متغیر و میانگین آن نیز 10/17 ‏بود. تعداد نوارهای چندشکل در این تحقیق برای آغازگرها حداقل 7 و حداکثر 21 نوار به‌دست آمد.در این تحقیق میزان‎ pic ‎بین 19/0 و ‏‏42/0 متغیر بود و میانگین آن نیز 29/0 به‌دست آمد. بیشترین‎ pic ‎مربوط به آغازگرissr2 ‎و کمترین‎ pic ‎نیز مربوط به آغازگرissr4 ‎بود. تجزیه‌خوشه‌ای نشان داد که در سطح تشابه 65 درصد اکوتیپ‌های مربوط به هر گونه در یک گروه و اکوتیپ‌های مربوط به گونه‌های ‏متفاوت در گروه‌های مجزا قرار گرفت، به طوریکه اکوتویپ‌های قزوین، تفت، یزد، ساری، کرمان و شیراز که همگی متعلق به گونه‎ ‎althaea rosea ‎بودند در یک گروه قرار گرفتند. در گروه دوم اکوتویپ‌های متعلق به گونه‎ althaea ficifolia ‎که شامل بهشهر، ‏گرگان، بم، رفسنجان، همدان و مشهد بودند قرار گرفت . در گروه سوم نیز اکوتیپ‌های گونه‎ althaea officinalis ‎که شامل اکوتیپ‌های ‏بشروئیه، کرمانشاه، اصفهان، جیرفت، فاریاب و بوشهر قرار گرفتند. نتایج تجزیه واریانس مولکولی نشان داد که 28 درصد از تنوع مربوط به ‏درون گونه‌ها و 72 درصد از تنوع مربوط به بین گونه‌های مورد مطالعه بود. نتایج تجزیه به مختصات‌اصلی نیز نتایج حاصل از تجزیه‌خوشه‌ای ‏را تایید کرد.‏نتیجه‌گیری: با توجه به نتایج به‌دست آمده نشانگر‎ issr ‎و آغازگرهای مورد بررسی در این آزمایش کارایی لازم را جهت تمایز اکوتیپ و ‏گونه‌های گل‌ختمی را دارا بودند و از طرفی با توجه به وجود تنوع‌ژنتیکی از اکوتیپ‌های مورد مطالعه در این آزمایش می‌توان به عنوان والدین ‏در پروژه‌های به‌نژادی این گیاه استفاده کرد و به منظور حفظ ژرم‌پلاسم و جلوگیری از فرسایش ژنتیکی، نگهداری اکوتویپ های مورد ‏مطالعه در این تحقیق در بانک های ژن گیاهی پیشنهاد می‌گردد‎.‎

dna fingerprinting in ecotypes of three marshmallow species using issr molecular marker

knowledge of genetic diversity is the basis of plant breeding and various aspects such as ‎selection of cross parents, protection of germplasm and prevention of genetic erosion are important. the ‎purpose of this research is to evaluate the genetic diversity and investigate the genetic relationships in ‎the native ecotypes of marigold in iran in order to be used in breeding projects and to protect the ‎genetic reserves of this plant. ‎‎ ‎materials and methods: in this research, after extracting dna from young leaves by ctab method, ‎the molecular diversity of 18 ecotypes of three species of marshmallow bud was investigated using 10 ‎issr primers. ‎‎ ‎results: the total number of bands formed by the primers studied in this research varied between 11 ‎and 23 for each primer. the number of polymorphic bands in this research for ‎the primers was at least 7 and at most 21 bands. in this research, the pic ranged between 0.19 and 0.42 ‎and its average was 0.29. the highest pic was related to the issr2 marker and the lowest pic was ‎related to the issr4 marker. cluster analysis showed that at the similarity level of 65%, the ecotypes ‎related to each species were in one group and the ecotypes related to different species were placed in ‎separate groups, so that the ecotypes of qazvin, taft, yazd, sari, kerman and shiraz which all of them ‎belonged to the althaea rosea species and were placed in one group. in the second group, the ecotypes ‎belonging to the althaea ficifolia species, which included behshahr, gorgan, bam, rafsanjan, ‎hamadan and mashhad, were placed.the results of molecular variance analysis showed that 28% of the variation is within the ‎species and 72% of the variation is among the studied species. the results of analysis to main ‎coordinates also confirmed the results of cluster analysis. ‎‎ ‎conclusion; according to the obtained results, the issr marker and the primers investigated in this ‎experiment have the necessary efficiency to distinguish the ecotypes and the species of khatami ‎flowers, and on the other hand, due to the genetic diversity of the ecotypes studied in this experiment, ‎it can be the title of the parents was used in the breeding projects of this plant, and in order to preserve ‎the germplasm and prevent genetic erosion, it is suggested to keep the ecotypes studied in this research ‎in plant gene bank ‎.