پروفایل بیانی ژن dnah1در بافت بیضه بز کرکی راینی

هدف: نشان داده شده که جهش در ژن dnah1 (dynein axonemal heavy chain 1) با فنوتیپ های mmaf (ناهنجاری‌های مورفولوژیکی چندگانه در تاژک‌ها) و pcd (دیسکینزی مژکی اولیه) مرتبط است. mmaf به طور گسترده در صفات تولیدمثلی نرها مورد مطالعه قرار گرفته است و اغلب با اسپرم غیرطبیعی همراه است که به طور جدی بر صفات باروری نرها تاثیر می گذارد و حتی منجر به ناباروری می شود. در واقع، به عنوان یک ژن وابسته به mmaf، بسیاری از مطالعات ژن dnah1  را به عنوان بازیگر اصلی و اساسی در رشد غدد جنسی نرها و ماده‌ها شناسایی کرده‌اند و کاربردهای بالینی ژن dnah1 را بررسی کرده‌اند.  pcdاغلب با اختلال حرکت مژک همراه است، که همچنین یک بیماری ژنتیکی اتوزومال مغلوب است. بیماران مبتلا به pcd  شدید ناباروری را نشان می دهند. هدف این پژوهش مطالعه الگوی بیان ژن  dnah1در بافت بیضه بز کرکی راینی بود.مواد و روش‌ها: از بافت بیضه سه راس (از هر راس 3 تکرار) بز کرکی راینی  در کشتارگاه نمونه گیری انجام شد. نمونه های جدا شده در میکروتیوب‌های 5/1 میلی لیتری قرار گرفت. استخراج rna کل از بافت‌ بیضه انجام شد. برای ارزیابی کیفیت و کمیتrna  استخراج شده از روش الکتروفورز روی ژل آگارز و uv اسپکتروفتومتری استفاده شد.. سپس cdna ساخته و real time pcr اجرا شد. همچنین از ژن خانه دار gapdh به عنوان کنترل استفاده شد. منحنی‌های ذوب بررسی و تجزیه و تحلیل داده‌های حاصل از real time pcr انجام شد.نتایج: نتایج منحنی‌های real time pcr و مشاهده نتایج الکتروفورز محصولات pcr روی ژل آگارز 2 درصد نشان داد که ژن dnah1 در بافت بیضه بیان شده است. برای ژن dnah1 باندی به اندازه 140 جفت باز و برای ژن gapdh باندی با اندازه 143 جفت باز مشاهده شد و صحت آزمایش تکثیر تایید شدنتیجه‌گیری: با توجه به نتایج پژوهش حاضر و نتایج سایر محققین می‌توان نتیجه گرفت که ژن dnah1 نقش مهمی در باروری دارد، در پژوهش حاضر مشخص شد ژن dnah1 در بافت بیضه بیان می‌شود. لذا، ژن dnah1 به احتمال زیاد برای باروری نرها بسیار ضروری است و نتایج این پژوهش راه را برای پژوهش‌های آینده جهت توصیف نقش ژن dnah1 به عنوان یک ژن کاندیدا برای باروری بهتر و فیزیولوژی طبیعی در حیوانات اهلی، به ویژه بز فراهم کرده است.

mRNA expression profile of DNAH1 gene in testis tissue of Raini Cashmere goat

ObjectiveIt has been shown that mutation in DNAH1 (Dynein Axonemal Heavy Chain 1) gene is associated with MMAF (multiple morphological anomalies of the flagella) and PCD (primary ciliary dyskinesia) phenotypes. MMAF has been widely studied in male reproductive traits and is often associated with abnormal sperm, which seriously affects male reproductive traits and even leads to infertility. Indeed, as a MMAFdependent gene, many studies have identified DNAH1 gene as a key and essential player in male and female gonadal development and have investigated the clinical applications of DNAH1 gene. PCD is often associated with ciliary motility disorder, which is also an autosomal recessive genetic disease. Animals with severe PCD show infertility. The aim of this study was to study the expression pattern of DNAH1 gene in the testicular tissue of Raini Cashmere goat using Real Time PCR. Materials and MethodsSampling was done from the testicular tissue of three heads (3 replicates from each head) of Raini Cashmere goat in the slaughterhouse. The isolated samples were placed in 1.5 mL microtubes. Total RNA was extracted from testicular tissue. Agarose gel electrophoresis and UV spectrophotometry were used to evaluate the quality and quantity of extracted RNA. Then cDNA was made and Real Time PCR was performed. Also, GAPDH housekeeping gene was used as a control. Melting curves were analyzed and data obtained from Real Time PCR were performed. Results  The results of Real Time PCR curves and observing the results of electrophoresis of PCR products on 2% agarose gel showed that DNAH1 gene is expressed in testicular tissue. For the DNAH1 gene, a band of 140 bp was observed and for the GAPDH gene, a band of 143 bp was observed, and the accuracy of the amplification test was confirmed. ConclusionsAccording to the results of the present study and the results of other researchers, it can be concluded that DNAH1 gene plays an important role in fertility. In the present study, it was found that DNAH1 gene is expressed in testicular tissue. Therefore, DNAH1 gene is most likely essential for male fertility, and the results of this research have provided the way for future studies to describe the role of DNAH1 gene as a candidate gene for better fertility and normal physiology in domestic animals, especially goats.