بیان ژن لپتین در بز کرکی راینی با استفاده از real time pcr

هدف: بز کرکی راینی یکی از مهمترین نژادهای بز در ایران است. این حیوانات هم برای تولید گوشت و هم برای تولید کرک نگهداری می شوند. یکی از اقدامات اساسی در حیوانات اهلی مطالعه ژن ها و پروتئین های مرتبط با صفات اقتصادی و مطالعه آنها در سطح سلولی یا کروموزومی است. یکی از ژن های مهم لپتین است. لپتین به وسیله بافت چربی سفید تولید می شود و نقش مهمی در تنظیم مصرف غذا، تعادل انرژی، باروری و فعالیت های ایمنی بازی می کند. هدف این پژوهش مطالعه بیان ژن لپتین در بافت های چربی، کبد، کلیه، شش و قلب در بز کرکی راینی با استفاده از تکنیک real time pcr بود. مواد و روش‌ها: از بافت های قلب، شش، کلیه، کبد و بافت چربی (از هر بافت 3 تکرار) از 6 بز کرکی راینی نمونه برداری انجام شد. از این بافت‌ها rna کل استخراج شد. rna استخراج شده در دمای منفی80 درجه سانتیگراد نگهداری شد. کیفیت و کمیت rna بررسی و سنتز  cdnaانجام شد. واکنش real time pcr برای ژن لپتین و بتااکتین صورت گرفت. محصولات pcr روی ژل آگارز 1.5 درصد الکتروفورز شد. منحنی‌های ذوب و سطوح مختلف بیان در بافت‌های ذکر شده، مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. نتایج: نتایج منحنی‌های real time pcr و مشاهده نتایج الکتروفورز محصولات pcr روی ژل آگارز نشان داد نشان داد که این ژن در تمامی بافت‌های بررسی شده بیان شده است و بیشترین سطح بیان در بافت چربی (4.5 برابر) و کبد (3.7 برابر) و کمترین سطح بیان در بافت‌های قلب (1.4 برابر) مشاهده شد. نتیجه‌گیری: این نتایج می تواند نشان دهنده این امر باشد که لپتین در متابولیسم چربی نقش ویژه ای دارد. مطالعات بیشتری باید انجام شود تا نقش لپتین در فیزیولوژی ساخت و متابولیسم چربی و مواد دیگر مشخص شود. این امر کمک خواهد کرد تا مکانیسم هایی برای شناخت اثر فاکتورهای تغذیه ای و چربی های بدن در فرآیندهای مختلف درک شوند.

Leptin gene expression in Raini Cashmere goat using Real Time PCR

Objective Raini Cashmere goat is one of the most important goat breeds in Iran. These animals are breed both for meat production and cashmere production. One of the basic measures in the domestic animals is the study of genes and proteins associated with economic traits and their study at cellular or chromosomal levels. One of these important genes is the leptin. Leptin is produced by white adipose tissue and plays an important role in the regulation of feed intake, energy balance, fertility and immune functions. The aim of this research was to study leptin gene expression in adipose tissue, liver, kidney, lung and heart of Raini Cashmere goat using Real Time PCR technique.   Materials and methods Tissue sampling from heart, lung, liver, kidney and adipose tissue (3 replicates from each tissue) of 6 animals was performed and RNA was extracted. Extracted RNA were immediately stored at 80°C.The Quality and quantity of RNA were evaluated and cDNA was synthesized and Real Time PCR was performed. PCR Products were electrophoresed on 1.5% agarose gel. Melting curves from Real Time PCR were examined and were evaluated different levels of expression in the studied different tissues.   Results The results of Real Time PCR curves and observation of electrophoresis of PCR products on agarose gel showed that the leptin gene was expressed in all the tested tissues and the highest level of expression was observed in adipose tissue (4.5) and liver (3.7) and the lowest level was detected in heart (1.4).   Conclusions These results may show that leptin plays a particular role in fat metabolism. Further studies are needed to clarify role of leptin in the physiology of fat metabolism and other materials. This would help us to better understand the mechanisms for the known effect of nutritional factors and body fatness on various functions.