انتقال ژن gus به گیاه زینتی begonia soli-mutata

هدف: بگونیا یکی از رایج‌ترین گیاهان زینتی در جهان است و امروزه توجه ویژه ای به استفاده از بیوتکنولوژی و مهندسی ژنتیک در تولید اقام جدید با فرم های متنوع در این جنس شده است. این آزمایش با هدف بهینه سازی باززایی و انتقال ژن در این گیاه انجام شد تا زمینه ی لازم برای انتقال ژنهای ارزشمند را فراهم کند. مواد و روش ها: ابتدا شاخه زایی ریزنمونه های لایه سلولی نازک دمبرگ گونه b. soli-mutata در محیط کشت ms حاوی سیتوکینین های kin یا tdz (0.2، 1 و 2 میلی گرم در لیتر) در ترکیب با naa (0 و 0.2 میلی گرم در لیتر) مورد ارزیابی قرار گرفت. برای همکشتی و تولید گیاهان تراریخته، ریزنمونه دمبرگ بگونیا با باکتری a. tumefacians نژاد lba4404 حاوی ژنgus و ژن گزینشگر nptii در محیط کشت ms حاوی یک ‌میلی‌گرم در لیتر kin‌ و 0.2 میلی گرم در لیتر naa کشت شد. برای تایید تراریختی گیاهچه های بدست آمده، از واکنش زنجیره‌ای پلیمراز با آغازگر‌های ژنهای gus و vir و آزمون ارزیابی gus استفاده شد. نتایج: نتایج حاصل از این بررسی نشان داد به لحاظ باززایی شاخه سیتوکینین kin نسبت به tdz برتری دارد و اضافه کردن naa به محیط کشت در هر دو تیمار سیتوکینین باعث بهبود تمام صفات شد. لذا برای همکشتی از محیط کشت حاوی یک ‌میلی‌گرم در لیتر kin‌ و 0.2 میلی گرم در لیتر naa استفاده شد. طی فرایند تولید گیاهان تراریخته، بعد از 4 ماه همکشتی 2000 ریزنمونه با باکتری در محیط کشت انتخابی حاوی 50 ‌میلی‌گرم در لیتر کانامایسین، در مرحله سازگاری 17 گیاهچه بدست آمد که تراریختی 7 گیاهچه با استفاده از واکنش زنجیره‌ای پلیمراز و آزمون ارزیابی gus تایید شد.نتیجه گیری: نتایج این بررسی نشان داد درصد تراریزش در این گیاه پایین است و بهینه کردن شرایط برای افزایش کارایی انتقال ژن در آن از اهمیت زیادی برخوردار است.