ارزیابی زنده مانی سلولهای بنیادی مزانشیمی مشتق از بافت چربی در محیط کشت شبیه سازی شده دیابت

مقدمه: در دیابت سلول های بنیادی با شرایط نامساعد بافتی مواجهه هستند که برخی از آنها عبارتند از غلظت بالای گلوکز در خارج سلول، استرس اکسیداتیو و محرومیت از فاکتورهای رشد متعاقب ایسکمی. هدف از این مطالعه بررسی تاثیر این شرایط بر سلولهای بنیادی است. روش کار: سلولهای بنیادی از بافت چربی زیرجلدی موشهای صحرایی جدا گردید. برای شبیه سازی حالت هیپرگلیسمی، سلولها 24 ساعت در محیط کشت حاوی mm 50-25 گلوکز نگهداری شدند. برای ایجاد مدل ایسکمی، سلولها برای 12 الی 36 ساعت در محیط فاقد گلوکز و فاکتورهای رشد تیمار شدند. به منظور القای استرس اکسیداتیو،2h2o با غلظتµm  800-100 برای 24 ساعت  افزایش گلوکز محیط از mm 25 به mm 50 اثری بر زندهمانی سلولهای بنیادی نداشت. درصد سلولهای زنده پس از به محیط سلول ها اضافه شد. زنده مانی سلول ها با آزمون تیازولیل بلو تترازولیوم تعیین گردید12: یافته ها، 24 و 36 ساعت مجاورت با محیط فاقد گلوکز و فاکتورهای رشد کاهش یافت 0.05 > p غلظتهای µm 400 و µm 800 از 2h2o درصد سلولهای زنده را کاهش داد 0.05 > p. افزایش غلظت گلوکز محیط کشت سمیت سلولی ناشی از 2h2o را افزایش نداد. نتیجه گیری: سلولهای بنیادی در کوتاه مدت به استرس اکسیداتیو و محرومیت از گلوکز و فاکتورهای رشد حساس تر از سمیت ناشی از گلوکز زیاد هستند. بنابراین، رادیکال های آزاد اکسیژن و اختلالات خون رسانی از علل اصلی آسیب سلول های بنیادی و لذا کاهش ترمیم بافتی در دیابت است.

Evaluating the Viability of Adipose Tissue-derived Mesenchymal Stem Cells in Diabetic Culture Media Model

Introduction: In diabetes mellitus, stem cells are exposed to inappropriate conditions such as an increase of glucose in extracellular space, oxidative stress, and deprivation from growth factors (following ischemia). This study was aimed to evaluate the effect of these conditions on stem cells. Methods: Stem cells were isolated from subcutaneous adipose tissue of rats. The cells were maintained for 24 h in culture medium containing 2550 mM glucose to simulate hyperglycemic condition. For the induction of the ischemic model, the cells were incubated for 1236 h with the medium deprived of glucose and growth factors. To induce oxidative stress, H2O2 was added at concentrations of 100800 µM to the medium of the cells for 24 h. The cell viability was determined using the Thiazolyl blue Tetrazolium Bromide assay.  Results: The increase in the glucose of culture medium from 25 mM to 50 mM did not affect the viability of stem cells. The percent of viable cells was significantly decreased after 12, 24, and 36 h incubation with glucose and growth factorsfree medium (P < 0.05). Concentrations of 400 and 800 µM of H2O2 significantly decreased the percent of viable cells (P < 0.01). The increase in the glucose of culture medium did not further enhance H2O2 cytotoxicity. Conclusions: In a short time, stem cells are more vulnerable to oxidative stress and deprivation from glucose and growth factors compared to glucotoxicity. Therefore, reactive oxygen radicals and blood flow disorders are of the main causes of stem cell damage and, as a result, reduced tissue regeneration in diabetes