ارزیابی بیان مارکرهای پرتوانی در کلونی‏های سلول‏هایES-like حاصل از اسپرماتوگونی و سلول‏های بنیادی جنینی

هدف: اخیرا ماهیت پرتوانی سلول‏های بنیادی اسپرماتوگونی (spermatogonial stem cells, sscs) در محیط کشت مورد توجه قرار گرفته است. هدف از تحقیق حاضر تولید سلولهای شبه بنیادی جنینی es-like cells) (embryonic stem like cells, از sscs و بررسی تغییرات مورفولوژیک و ژنتیکی در این سلول‏ها نسبت به سلول‏های بنیادی جنینی escs) (embryonic stem cells, است.مواد و روش‏ها: سلول‏های اسپرماتوگونی از بیضه موش نوزاد با استفاده از یک روش هضم مکانیکی و آنزیمی دو مرحله‏ای استخراج شده و در محیط حاوی dmem و fbs 15 درصد کشت داده شدند. به‏طوری‏که در پاساژ پنجم کلونی هایes-like cells حاصل شد. بیان ژن‏های اختصاصی اسپرماتوگونی stra8،,dazl plzf و ژن‏های پرتوانی nanog، sox2، klf4 به‏روش rt-pcr، فعالیت آنزیم آلکالین فسفاتاز و نشانگر پرتوانی oct4 به‏روش ایمونوسیتوشیمی در سلول‏هایes-like cells بررسی و با سلول‏های escs مقایسه شد.نتایج: ماهیت سلول‏های es-like cells حاصله توسط معیارهای نظیر مورفولوژی، میزان بالای فعالیت آلکالین فسفاتاز و نشانگر پرتوانی oct4 مورد تایید قرار گرفت. طی تبدیل سلول‏های اسپرماتوگونی به سلول‏های es-like cells بیان ژن‏های اختصاصی نظیر stra8،,dazl plzf کاهش و بیان ژن‏های پرتوانی نظیر nanog، sox2، klf4 افزایش می‏یابد. نتیجه‏گیری: کشت سلول‏های اسپرماتوگونی منجر به تولید کلونی‏های es-like cellsمی شود این فرآیند همراه با تغییرات ژنتیکی گسترده‏ای در بیان ژن‏های اختصاصی اسپرماتوگونی و ژن‏های پرتوانی در سلول‏های es-like cells می‏باشد. در مجموع سلول‏های اسپرماتوگونی می‏تواند دریچه‏ای به‏سمت دستیابی به سلول‏های پرتوان مورد استفاده قرار گیرد.