اثرات ترکیبات فلاونوئیدی پوست سبز گردو بر افزایش بازده سلول درمانی با کمک تمایز سلول‏های بنیادی مزانشیمی مشتق از بافت چربی به سلول‏های تولید کننده انسولین درموش‏های صحرایی مدل دیابتی

هدف: در این مطالعه اثر ترکیبات فلاونوئیدی پوست سبز گردو را بر تولید سلول‏های ترشح کننده انسولین بررسی شد.مواد و روش‏ها: در این تحقیق تجربی سلول‏های بنیادی مزانشیمی مشتق از بافت چربی (ad-mscs)در شرایط استریل به‏مدت21 روز در مجاورت عصاره فلاونوئیدی با دوزهای 50 و 100 میلی‏گرم بر میلی‏لیتر سلول‏های انسولین ساز تمایز داده شدند. برای دیابتی کردن رت‏ها از استرپتوزوتوسین با دوز 60 میلی‏گرم بر کیلوگرم استفاده شد. از رنگ‏آمیزی دیتیزون (dtz) برای حضور انسولین، از روش ایمونوفلورسانس جهت تعیین حضور پروتئین‏های اختصاصی سلول‏های بتای پانکراس، اندازه‏گیری قند خون توسط دستگاه گلوکومتر،  سطح کراتین، اوره و اسیداوریک سرم از روش کالریمتری و از رونویسی معکوس واکنش زنجیره‏ای پلی‏مراز (rtpcr) برای ارزیابی بیان ژن pax4   استفاده شد.نتایج: تحت شرایط فوق به‏تدریج از سلول‏های دوکی شکل فیبروپلاستی به سلول‏های مدور تغییر و سلول‏های انسولین ساز با استفاده از رنگ dtz به‏رنگ قرمز رویت و ترشح انسولین را نشان دادند. بیان نشان‏گرهای انسولینپروانسولین و گیرنده بتا اثبات شد، میزان قند خون، اوره، اسیداوریک و کراتین کاهش و سطح بیان ژن pax4 در گروه‏های تجربی اختلال معنی‏داری را نشان دادند(0.05≥p).نتیجه‏گیری: نتایج به‏دست آمده نشان داد کهad-mscs  تحت عصاره فلاونوئیدی پوست سبز گردو توانایی تمایز به سلول‏های تولیدکننده انسولین را دارند.

Effects of flavonoid compounds in walnut green skin on increasing cell therapy efficiency by differentiating adiposederived mesenchymal stem cells into insulinproducing cells in diabetic rats

Aim: In this study, investigated the effect of flavonoid compounds in walnut skin on the production of insulinsecreting cells.Material and Methods: In this experimental study, adiposederived mesenchymal stem cells (AD-MSCs) were differentiated into insulinproducing cells under sterile conditions for 21 days in the presence of flavonoid extract at doses of 50 and 100 mg/ml. Streptozotocin at a dose of 60 mg/kg was used to diagnose rats. Dithizone staining (DTZ) for insulin, Immunofluorescence to determine the presence of pancreatic betaspecific proteins, Blood glucose measurement by glucometer, Serum creatine, urea and uric acid levels by calorimetry and Reverse chain reaction transcription Epolymerase (RTPCR) was used to evaluate the expression of PAX4 gene.Results: AD-MSCs under the above conditions gradually changed from spindleshaped fibroblasts to circular cells and showed insulinproducing cells using red DTZ dye and insulin secretion. Expression of insulinpronsulin and beta receptor markers was demonstrated, blood sugar, urea, uric acid and creatinine levels decreased and the expression level of PAX4 gene in experimental groups showed a significant disorder (P≥0.05).Conclusion: The results showed that AD-MSCs under the flavonoid extract of walnut green skin have the ability to differentiate into insulinproducing cells.