اثر سطوح مختلف لسیتین سویا بر کیفیت منی و نسبت جنسیت اسپرم گاو هلشتاین با تکنیک realtime qpcr

هدف: پژوهش حاضر به منظور بررسی استفاده از سطوح مختلف لسیتین سویا در رقیق کننده تریس بر کیفیت منی و نسبت جنسیت با استفاده از تکنیک realtime qpcr اجرا شد. مواد و روشها: نمونه گیری از چهار گاو نر نژاد هلشتاین، یک بار در هفته انجام شد و سپس نمونه های مناسب با هم مخلوط شدند. نمونه های اسپرم (در چهار تکرار) به سه گروه شامل صفر، یک و دو درصد لسیتین سویا اختصاص داده شد. و فراسنجه های کیفی و نیز نسبت جنسیت منی در آن ها تعیین شد. در این تحقیق به منظور شستشوی منی و حذف سلول های مرده، از تکنیک شنا به‏سمت بالا (swim up) استفاده شد. ژن‏های plpو sry به‏ترتیب برای جداسازی قطعات خاصی از توالی‏های کروموزوم x وy تکثیر شدند. در این روش par به‏عنوان ژن مرجع جهت نرمال سازی داده های حاصل از بیان ژن در واکنش real time -qpcr استفاده شد. نتایج: نتایج پژوهش حاضر نشان داد که تکنیک swim up و سطوح مختلف لسیتین سویا موجب بهبود کیفیت منی شدند. علاوه‏ براین، استفاده از تکنیک swim up باعث کاهش معنی دار بیان ژنplp (0.11±0.75) و افزایش معنی دار بیان ژن sry (0.13±1.37) شد. اما استفاده از سطوح مختلف لسیتین سویا تغییری در نسبت جنسیت اسپرم ایجاد نکرد. نتیجه گیری: به‏طورکلی، لسیتین سویا یک‏ جایگزین مناسب برای منابع حیوانی بوده و موجب بهبود کیفیت مایع منی می‏شود. با توجه به محدودیتهای موجود در استفاده از منابع حیوانی در رقیق کننده گاو، استفاده از لسیتین سویا به‏عنوان یک منبع گیاهی پیشنهاد می‏شود.

The effect of different levels of soybean lecithin on semen quality and sex ratio of Holstien bull sperm by Realtime qPCR technique

Aim: This study was designed to investigate the use of different levels of soybean lecithin in the Tris extender on semen quality and sex ratio using realtime qPCR technique. Material and Methods: Sampling of 4 Holstien bulls was performed once a week, then the appropriate samples were mixed. Samples of sperm (in 4 replications) were divided into three groups: zero, one and two percentage soybean lecithin. The qualitative parameters and the sex ratio of the semen were determined. Swim up technique was used to wash the semen and remove the dead cells. Moreover, the PLP and SRY genes were propagated to separate the specific fragments of X and Y chromosomes sequences. In this procedure, PAR was used as a housekeeping gene to normalize the gene expression data in realtime qPCR. Results: The results showed that swim up technique and different levels of soybean lecithin improve the semen quality. In addition, swim up technique significantly reduced PLP gene expression (0.75±0.11), against increased SRY gene expression (1.37±0.13). However, using of different levels of soybean lecithin did not change the sex ratio of the sperms. Conclusion: In general, soybean lecithin is an appropriate substitute to animal sources and improves the quality of semen. Due to the limitations of using animal resources in bull extenders, the use of soybean lecithin as a plant source is suggested.