تکوین بلاستومرهای منفرد جداشده از جنین‌های 2 سلولی و 4 سلولی موش به بلاستوسیست‌ جهت استخراج و تولید سلول‌های بنیادی جنینی بدون استفاده از سلول‌های تغذیه کننده

هدف: تعیین شرایط بهینه که در آن بلاستومرهای جنین های 2 و 4 سلولی موش با کیفیت بالایی به بلاستوسیت تکوین پیدا کنند و تولید سلول های بنیادی جنینی(esc) از این بلاستوسیست ها بدون حضور سلول های تغذیه کننده.مواد و روش ها: ابتدا جنین های 2 و 4سلولی از اویداکت موش های nmri جمع آوری شدند. بلاستومرها جدا شده و در سه وضعیت منفرد، گروهی و هم کشتی با جنین در محیط کشت با حجم 1و5 میکرولیترکشت شدند. سپس بلاستوسیست های حاصل، بر روی ظروف کشت پوشیده شده با ژلاتین کشت شدند تا به سلول های es تبدیل شوند. بیان نشان‫گرهای اختصاصی برای بلاستوسیست ها و سلول های es مشتق شده به‫روش ایمونوسیتوشیمی و pcr بررسی شد.نتایج:  ثابت شد که حجم 1 میکرولیتر بهتر از 5 میکرولیتر عمل کرد و در حالت هم کشتی با جنین و کشت گروهی، در مقایسه با کشت منفرد نتیجه بهتری حاصل شد و درصد بلاستوسیست های حاصل به‫طور معنی‫داری بالا بود. ارزیابی بیان oct4 که در ناحیه icm (توده سلولی داخلی) بلاستوسیست بیان می شود و شمارش سلول، ثابت کرد که کمیت و کیفیت با هم افزایش می یابد. همچنین مشخص شد که پتانسیل بلاستومرهای 4 سلولی نسبت به 2 سلولی پایین می باشد. بلاستوسیست های مشتق از کشت منفرد بلاستومرها توانستند در محیط اختصاصی، تبدیل به سلول های es شوند و این سلول ها توانایی تمایز به سلول های مختلف را هم نشان دادند.نتیجه گیری: روش مطالعه حاضر برای بررسی پتانسیل تکوینی بلاستومرها و تولید سلول های es می تواند برای سایر گونه ها کاربرد داشته باشد. تولید سلول های es بدون سلول های تغذیه کننده، در مورد انسان موضوع بسیار پراهمیت و پر چالشی می باشد.