هدفمند سازی بیان آنتی ژن سطحی هپاتیت ب (hbsag) در غده های سیب زمینی با استفاده از روش بیان موقت

هدف: به‫منظور بررسی کارایی پیش‫بر اختصاصی غده (patatin1)، بیان آنتی ژن hbsag واکسن هپاتیت ب در گیاه سیب زمینی با استفاده از روش بیان موقت (اگرواینفیلتریشن) مورد ارزیابی قرار گرفت. مواد و روش ها: پیش‫بر اختصاصی غده (pat1) با استفاده از آغازگرهای اختصاصی با روش واکنش زنجیری پلیمراز (pcr) از گیاه سیب زمینی جدا شد. این پیش‫بر در بالادست ژن بهینه سازی شده سنتزی hbsag در ناقل دوگانه pbi121 همسانه سازی شد. به‫منظور مقایسه کارایی پیش‫بر اختصاصی pat1، ژن hbsag تحت کنترل پیش‫بر دایمی camv35s هم قرار داده شد. سازه های تهیه شده پس از انتقال به اگروباکتریوم با استفاده از روش اگرواینفیلتریشن به غده ها و برگ های گیاه سیب زمینی انتقال یافتند. بیان موقت آنتی ژن hbsag با استفاده از روش الایزا اندازه گیری شد.   نتایج: بررسی بیان آنتی ژن hbsag در برگ ها و غده های گیاه سیب زمینی نشان داد که پیش‫بر pat1 به‫طور اختصاصی باعث بیان بالای آن در بافت های غده ای می شود. بیان اندک این آنتی ژن تحت کنترل پیش‫بر pat1 در بافت های برگی هم گزارش شده و می تواند تاحدی به عوامل القا کننده در محیط تلقیح بستگی داشته باشند. در حالی‫که بیان آنتی ژن تحت پیش‫بر دایمی camv35s در تمامی بافت های برگی و غده ای اتفاق می افتد. همچنین نتایج حاصل نشان داد که ژن hbsag بهینه شده کدنی برای گیاه سیب زمینی به‫خوبی عمل کرده و آنتی ژن مربوط را بیان می کند. نتیجه گیری: نتایج این پژوهش نشان می دهد که از پیشبر اختصاصی غده سیب زمینی pat1 همسانه سازی شده می توان به‫طور موثری برای بیان دایمی آنتی ژن سنتزی بهینه سازی شده کدنی hbsag در گیاهان تراریخت سیب زمینی استفاده کرد.