مهار تکثیر سلول‌های calu-6 سرطان ریه با استفاده از shrna ژن cdc42

هدف: در پژوهش حاضر بیان ژن cdc42 در سلول‌های calu-6 مربوط به کارسینومای ریه با استفاده از سیستم مهاری shrna کاهش یافته و اثرات این کاهش بر رشد و تکثیر سلولی بررسی شد.مواد و روش‌ها: به‫منظور کاهش بیان ژن cdc42 از مکانیسم مهاری shrna استفاده شد. سیستم‌ لنتی‌ویروسی برای رسانش shrna اختصاصی ژن cdc42 به سلول‌های calu-6 انتخاب شد. لنتی‌ویروس‌های نوترکیب به‫کمک لیپوفکتامین و از طریق ترانسفکشن هم‫زمان سه پلاسمید pmd2g، pspax2 و p-gfp-c-shlenti به‫درون سلول‌های 293t تولید شد. سلول‌های calu-6 تحت تیمار با لنتی‌ویروس نوترکیب قرار گرفتند. صحت ترانسداکشن با میکروسکوپ فلورسنس مورد بررسی قرار گرفت. بررسی ماندگاری زیستی سلول‌های calu-6، با انجام سنجش mtt انجام شد.نتایج: بررسی‌های میکروسکوپ فلورسنس در 48 ساعت پس از ترانسفکشن نشان داد حدود 80 درصد سلول‌های 293t ترانسفکت شدند.نتایج میکروسکوپ فلورسنس پس از تیمار سلول‌های calu-6 با ویروس نشان دهنده صحت ترانسداکشن این سلول‌ها است سنجش mtt نیز نشان داد که سرعت رشد سلول‌های ترانسداکت شده با لنتی‌ویروس حاوی cdc42-shrna در مقایسه با سلول‌های کنترل، 58 درصد و نسبت به سلول‎های کنترل منفی 40 درصد کاهش یافت.نتیجه‌گیری: لنتی‌ویروس‌های نوترکیب، وکتورهای مناسبی جهت انتقال shrna-cdc42 به سلول‌های calu-6 بوده و این انتقال منجر به کاهش تکثیر سلول‌های calu-6 شد. کاهش میزان تکثیر سلول‌های سرطان ریه به‫واسطه سیستم مهاری لنتی‌ویروسی-shrna یک اثر پایدار و طولانی مدت می‌باشد که می‌تواند در ژن‌درمانی این سرطان مورد توجه قرار گیرد.