جداسازی، کشت و تعیین هویت سلول‌های بنیادی مشتق از بافت چربی با استفاده از روش اکسپلنت_آنزیمی

هدف: در این مطالعه، ترکیبی از روش آنزیمی و اکسپلنت را برای جداسازی و کشت سلول های بنیادی چربی مورد استفاده قرار گرفت.مواد و روش ها: بافت چربی ناحیه ی شکم از رَت های نر نژاد ویستار جدا شد. بافت ها به قطعات کوچک (mm2≈( تقسیم شدند، سپس آنزیم trypsin –edta با غلظت 25/0 درصد به بافت ها افزوده شد و به‫دنبال آن به‫مدت 30 دقیقه در دمای 37 درجه سانتی گراد در انکوباتور شیکردار قرار داده شدند. سپس بافت تیمار شده با آنزیم سانتریفیوژ شده و قطعات شناور کشت داده شدند. آنالیزهای آماری  مربوط به تعداد سلول ها  با استفاده از نرم افزار graphpad prismv6 مورد بررسی قرار گرفت.نتایج: نتایج نشان داد که جمعیت سلول های بنیادی چربی جداسازی شده توسط این روش ترکیبی، تحت تاثیر تنش کمتری قرار خواهند گرفت و جمعیت سلولی همگن و مشابهی را از لحاظ ظاهری و ریخت شناسی نشان خواهند داد و نیز آنالیز فلوسایتومتری مارکر های سطحی نشان داد که این سلول ها برای cd73، cd105، cd44 و cd90  مثبت و برای cd34، cd45 و cd11b  منفی بودندنتیجه گیری: در این مطالعه نشان داده شد که سلول های بنیادی مشتق از بافت چربی رت می تواند با روش جدید اکسپلنت_آنزیمی جداسازی شوند که این روش، یک روش کشت سلولی با قابلیت تکرارپذیری بالا و بسیار به صرفه از لحاظ اقتصادی برای کاربردهای کلینیکی می باشد.