بررسی اثرات سمیت سلولی و آپوپتوزیسی داروی اگزالی پلاتین بر روی رده سلولی سرطان کولون (ht29) و آنالیز بیان ژن‫های آپوپتوزیسی کاسپاز 3 و کاسپاز 9 توسط روش real time pcr‬‬‬‬‬‬

هدف: هدف از این مطالعه بررسی اثرات سمیت سلولی داروی اگزالی پلاتین بر رده سلولی سرطان کولون (ht29) و آنالیز بیان ژن های آپوپتوزی کاسپاز 3 و 9 می باشد.مواد و روش‫ها: در این مطالعه، ابتدا سمیت سلولی داروی اگزالی پلاتین بر روی رده سلولی ht29 با استفاده از روش mtt‌ در غلظت‫های 100، 50، 25، 12/5، 6/25 و 3/125 میکروگرم در میلی لیتر بررسی شد و غلظت 50 درصد کشندگی (ic50) آن تعیین شد. پس از تیمار سلول‫ها با غلظت ic50، rna سلول‫ها استخراج شده و به cdna تبدیل شد و میزان بیان ژن‫های آپوپتوزیسی کاسپاز 3 و 9 نسبت به ژن مرجع β-actin با استفاده از روش real time pcr بررسی شد.نتایج: تیمار سلول‫ها در غلظت های مختلف نشان داد که داروی اگزالی پلاتین در غلظت 100 میکروگرم در میلی‫لیتر بیشترین اثر سمیت سلولی را دارد که از لحاظ آماری معنی‫دار می‫باشد و میزان ic50 µg/ml 6 محاسبه شد. هم‫چنین، نسبت بیان ژن‫های آپوپتوزیسی کاسپاز 3 و 9 به ژن مرجع در رده سلولی ht29‌ تیمار شده با اگزالی پلاتین به‫ترتیب به‫میزان (p<0.001) 2.69±0.72 و (p<0.001) 3.26±0.56 افزایش یافت.نتیجه گیری: با توجه به سمیت سلولی و القای فرایند آپوپتوزیس در رده سلولی سرطان کولون توسط داروی اگزالی پلاتین، می‫توان نتیجه گیری کرد که داروی اگزالی پلاتین گزینه مناسب جهت درمان سرطان کولون می‫باشد.

Cytotoxicity and apoptotic effect of oxaliplatin on colon cancer cell line (HT29) and analysis of caspase 3 and caspase 9 gene expression using Real Time PCR method

Aim: The aim of this study is investigation of cell toxicity of oxaliplatin on colon cancer cell line and analysis of caspase 3 and 9 apoptotic genes. Material and methods: In this experimental study, cytotoxicity of oxaliplatin on colon cancer cell line (HT29) was evaluated using MTT method in different concentrations including 100, 50, 25, 12.5, 6.25 and 3.125 µg/mL and the IC50 value was determined. After treatment of HT29 cells with IC50 value, the cells RNA was extracted and converted to cDNA. Subsequently, the expression level of caspase 3 and caspase 9 apoptotic genes comparing to housekeeping gene (βactin) was measured using Real Time PCR. Results: Treatment of HT29 cells with various concentrations of oxaliplatin including show that oxaliplatin has the highest cytotoxic effect in 100 µg/mL, which is statistically significant (P<0.05). In addition to, the IC50 value of oxaliplatin was 6 µg/mL. Moreover, the expression ratio of caspase 3 and 9 genes comparing to βactin gene in HT29 cells treated with oxaliplatin were upregulated (2.69±0.72 (P<0.001), 3.26±0.56 (P<0.001), respectively).  Conclusion: According to cell toxicity and apoptosis induction in HT29 cells by oxaliplatin, it can be concluded that this drug is an appropriate choice for treating of colon cancer.