ترانسفکت سلول حشره sf9 توسط باکولوویروس نوترکیب واجد ژن core+1 ویروس هپاتیت سی سویهjfh1 ژنوتایپ 2a به منظور بیان این پروتئین

سابقه و هدف: در سال های اخیر پروتئین جدیدی بنام core+1 گزارش شده است که به وسیله یک تغییر ریبوزومی 1+ در ناحیه کد کننده پروتئین core ویروس هپاتیت سی تولید می شود. این مطالعه با هدف طراحی و ساخت وکتور باکولوویروس واجد توالی core+1 hcv-2a (jfh1) تولید باکولوویروس نوترکیب و تایید ترانسفکت آن در سلول های حشره انجام شد. مواد و روش ها: در این مطالعه، از ژن core+1 hcv-2a (jfh1) که در پلاسمید puc57 به صورت تجاری سنتز شده بود استفاده گردید. ژن مورد نظر در پلاسمید pfastbac-hta  همسانه سازی مجدد شد و توسط این وکتور انتقالی در میزبان اشریشیا کلی dh10bac با عمل ترانسپوزیشن، بکمید باکولوویروس نوترکیب به دست آمد. سازه نوترکیب پس از تایید با واکنش زنجیره ای  پلی مراز، برای ساخت با کولوویروس نوترکیب در سلول حشره sf9 ترانسفکت گردید. وجود پروتئین نوترکیب core+1 در سلول حشره با روش sds-page و وسترن بلات مورد تایید قرار گرفت. یافته ها: همسانه سازی صحیح ژن 1+core در وکتور انتقالی pfastbac با استفاده از برش آنزیمی و تعیین توالی تایید گردید. واکنش زنجیره ای پلی مراز نشان دهنده صحت طول نواحی تکثیر یافته هدف روی بکمید، ایجاد ترانسپوزیشن و نوترکیبی بکمید نوترکیب بود. اثرات سایتوپاتیک سلول sf9 نشان دهنده ایجاد باکولوویروس نوترکیب بود. پروتئینcore+1 hcv-2a (jfh1)  به طور موفقیت آمیز بیان گردید. نتیجه گیری: با طراحی و ساخت وکتور باکولوویروس و تولید باکولوویروس نوترکیب می توان پروتئین core+1  مشابه با پروتئین ساخته شده ویروسی را بیان نمود. این عمل پایه انجام مطالعات آینده خواهد بود.