همسانه سازی زنجیره سنگین ژن نوروتوکسین باکتری کلاستریدیوم بوتولینیوم در باکتری اشریشیا کلی

سابقه و هدف: بوتولیسم یک بیماری ناشی از فعالیت نوروتوکسین‌های بوتولینوم می‌باشد که توسط باکتری کلاستریدیوم بوتولینوم تولید شده و در انتقال محرک‌های عصبی و عضلانی ایجاد اختلال می‌نماید. نوروتوکسین‌های این باکتری از سمی‌ترین مواد شناخته شده هستند به طوری که با جلوگیری از آزاد شدن استیل کولین در پایانه‌های عصبی، موجب فلج کردن عضلات می‌شوند. این پژوهش با هدف همسانه سازی زنجیره سنگین ژن نوروتوکسین باکتری کلاستریدیوم بوتولینیوم به عنوان کاندیدای واکسن ژنی در باکتری اشریشیا کلی انجام گرفت. مواد و روش‌ها: در این مطالعه، توالی کامل زنجیره سنگین ژن نوروتوکسین باکتری کلاستریدیوم بوتولینیوم با استفاده از پرایمرهای اختصاصی و روش pcr تکثیر گردید. قطعه dna مربوط به زنجیره سنگین ژن نوروتوکسین به روش t/a cloning در حامل pcr 8/gw/topo کلون و ساختار حاصل به باکتری اشریشیا کلی ترانسفورم گردید.یافته‌ها: با استفاده از روش pcr همسانه سازی قطعه 2530 جفت بازی مربوط به زنجیره سنگین نوروتوکسین تایید گردید. نتایج مرحله بعد نیز نشان دهنده همسانه سازی موفقیت آمیز زنجیره سنگین ژن نوروتوکسین باکتری کلاستریدیوم بوتولینیوم در باکتری اشریشیا کلی بود. تایید نهایی سازواره تهیه شده با استفاده از آنزیم‌های hindiii و bamhi انجام شد.نتیجه گیری: با توجه به نتایج به دست آمده در این مطالعه به نظر می‌رسد که سازه ژنی تولید شده در این پژوهش می‌تواند به عنوان واکسن ژنی علیه نوروتوکسین بوتولینیوم در تحقیقات آینده مورد استفاده قرار گیرد.