همسانی ژنتیکی سویه های واکسن مایکوپلاسما آگالاکتیه جدا شده از طالقان، لرستان و شیراز در ایران

سابقه و هدف: ایران یکی از اصلی ترین کانون های فعالیت مایکوپلاسما آگالاکتیه در دام های نشخوارکننده در جهان شناخته است. سه سویه بومی طالقان، لرستان و شیراز برای تولید تنها نمونه واکسن کشته علیه آگالاکسی در ایران مورد استفاده قرار می گیرند. این مطالعه با هدف آگاهی از ارتباط ژنتیکی میان این سویه ها انجام شد.مواد و روش ها: از هر سه سویه بومی طالقان، لرستان و شیراز کشت تازه در محیط آبکوشت pplo تهیه و ماده ژنتیکی با روش جوشاندن استخراج گردید. چهار واکنش مستقل pcr  بر مبنای 4 لوکوس vntr5، vntr9، vntr17 و vntr19 تنظیم و در مورد هر سه سویه اجرا گردید. توالی نوکلئوتیدهای تمامی محصولات pcr تعیین گردید.یافته ها: نتایج به دست آمده بر مبنای توالی نوکلئوتیدها در هر 4 لوکوس وجود همسانی کامل در میان ژنوم سه سویه را نشان داد. از طرف دیگر به جز لوکوس vntr19 سویه های سه گانه ایرانی در هر سه لوکوس دیگر با سویه شاخص pg2 مایکوپلاسما آگالاکتیه همسان مشاهده شدند. در لوکوس vntr19 تنها تفاوت مشهود اضافه شدن 3 نوکلوتید به طول این لوکوس در سویه های ایرانی بود.نتیجه گیری: همسانی ژنتیکی در میان سه سویه ایرانی می تواند نشانه فعالیت یک یا چند کلون های بومی اجدادی باکتری در جغرافیای ایران باشد که در طول تاریخ دامپروری این کشور پیدایش و تکامل یافته اند. در نتیجه ضعف در اعمال سیاست های کنترل بیماری به صورت هموژن و غالب منتشر شده است. در توضیح چگونگی شباهت میان سه سویه ایرانی و سویه pg2 می توان آنرا به تشابه تصادفی در فرآیند تکاملی (حالت هموپلازی) و یا متاثر از مداخلات انسانی از راه فعالیت های دامپروری مانند واردات دام از خارج مربوط دانست. اعمال روش های استاندارد ژنوتایپینگ بر روی تعداد بیشتر جدایه های ایرانی می تواند به درک صحیح این موضوع کمک نماید.

Homogeneity of Mycoplasma agalactiae vaccine strains isolated from Taliqan, Lorestan, and Shiraz in Iran

Background Objectives: Iran continues to hold one of the most currently active world foci of agalaxy in ruminants. The three local strains of Taliqan, Lorestan, and Shiraz have been used for many years in preparation of the only commercially available killed vaccine against agalaxy in the Iranian market. This study was conducted to determine the genetic link between these strains. Materials Methods: All three strains of Taleghan, Lorestan, and Shiraz were cultivated freshly on PPLO agar media. The genetic material was extracted by boiling method. In order to investigate the genomic relations between these strains, a Multi-Locus Variable Number Tandem Repeat Analysis (MLVA) strategy concentrating on 4 VNTR loci of 5, 9, 17, and 19 was employed. The nucleotide sequences of all PCR products were determined, as well. Results: Nucleotide sequence analysis showed an identical MLVA pattern by all the three strains. When compared to the Mycoplasma agalactiae PG2 laboratory strain, the only VNTR19 locus was different between Iranians and the PG2 strain, with respect to a 3bps addition at this locus in Iranian strain. Conclusion: The identical genetic pattern of the three Iranian strains is likely an indication of the activity of one or more indigenous ancestral clone in the geography of Iran that has been appeared and evolved throughout its livestock history and became homogeneous and predominant due to the absence of efficient disease control policies. The similarity between three Iranian and the PG2 strains might be due to homoplasy or human intervention through animal husbandry activities such as livestock importation. Applying standard genotyping methods to a larger number of local isolates help to better assess this observation.