شناسایی جهش های نواحی جهش پذیر داغ ژن erg11 در جدایه های مقاوم به فلوکونازول کاندیدا آلبیکنس درغرب مازندران

سابقه و هدف: امروزه مصرف گسترده فلوکونازول باعث مقاومت در سویه های کاندیدا آلبیکنس شده است. تغییرات ساختاری erg11p در نتیجه جهش در ژن erg11 یکی از مکانیسم های مقاومت آزولی است. این مطالعه با هدف بررسی جهش های ژن erg11 در جدایه های کاندیدا آلبیکنس مقاوم به فلوکونازول در غرب استان مازندران انجام شد.مواد و روش ها: در این مطالعه مقطعی توصیفی، نمونه های بالینی از مخاط واژینال 120 زن در بیمارستان های غرب مازندران به دست آمد. جدایه های کاندیدا آلبیکنس با استفاده از روش های استاندارد مانند لوله زایا و کشت در محیط کروم آگار تعیین هویت شدند. مقاومت و حساسیت  جدایه ها نسبت به فلوکونازول به کمک روش های کربی بوئر و براث ماکرودایلوشن ارزیابی گردید. سپس جهش های ژن erg11 در جدایه های بالینی به روش pcr و توالی یابی در مقایسه با جدایه ptcc 5027 (atcc10231) تعیین شد.یافته ها: از 45 جدایه کاندیدا آلبیکنس،40 جدایه مقاوم و 5 جدایه حساس به فلوکونازول بودند. mic فلوکونازول µg/ml ≤  64 تعیین شد. آنالیز pcr- توالی یابی آشکار کرد که 18 جدایه مقاوم به فلوکونازول شش جهش بدمعنی (y257h، e266d، v404i، d421n، v488i و d504v) را در ژن erg11 داشتند.نتیجه گیری: جهش های شناسایی شده در این مطالعه ممکن است با کاهش تمایل فلوکونازول به erg11p در ایجاد مقاومت به فلوکونازول در جدایه های  کاندیدا آلبیکنس در غرب استان مازندران نقش داشته باشند.

Investigation of mutations in hotspot regions of ERG11 gene in fluconazole-resistant isolates of Candida albicans in the west of Mazandaran

Background Objectives: Nowadays, widespread use of fluconazole has resulted in resistance in Candida albicans strains. The conformational changes of Erg11p due to mutations in the ERG11 gene is one of the mechanisms resulting in azole resistance. The aim of our study was to investigate ERG11 gene mutations in fluconazole-resistant isolates of C. albicans in the west of Mazandaran province.Materials Methods: In this descriptive cross-sectional study, clinical specimens were obtained from vaginal mucosa of 120 women in hospitals of the west of Mazandaran province. C. albicans isolates were identified by standard methods such as germ tubes and CHROMEagar medium culture. The fluconazole resistance and susceptibility of the isolates were evaluated by Kirby Bauer and broth micro-dilution methods. Then, ERG11 gene mutations in resistant isolates were determined by PCR-sequencing method as compared with PTCC5027 (ATCC10231) reference strain.Results: Out of 45 C. albicans isolates, 40 isolates were resistant and 5 isolates were susceptible to fluconazole. The MIC of fluconazole was determined as ≥ 64 µg/ml. PCR-sequencing analysis revealed that 18 fluconazole-resistant isolates have six missense mutations (Y257H, E266D, V404I, D421N, V488I, and D504V) in the ERG11 gene.Conclusion: The identified mutations in this study may play role in developing fluconazole resistance in C. albicans isolates in the west of Mazandaran province by decreasing fluconazole affinity to ERG11p.