>
Fa   |   Ar   |   En
   Kinetic Study of Erythrose Reductase Extracted From Yarrowia Lipolytica  
   
نویسنده Mohammadi Farsani Masoud ,Mohammadi Mohammad ,Ghezelbash Gholam Reza ,Shahriari Ali
منبع Journal Of Cell And Molecular Research - 2019 - دوره : 10 - شماره : 2 - صفحه:97 -101
چکیده    Erythritol as a non-caloric and non-cariogenic sweetener is safe for diabetics. both microbial fermentation and chemical methods can be used to produce erythritol, but chemical methods failed to be industrialized due to their low efficiency. moniliella tomentosa, aureobasidium sp. and yarrowia lipolytica are industrial producers of erythritol. erythrose reductase (er) is a key enzyme in the biosynthesis of erythritol and catalyzes the final step in this pathway. enzyme extract was obtained from y. lipolytica by grinding cells with 0.5mm glass beads and er activity was performed using 10 μl enzyme extract, 7.5 mm nadph and 12 mm d-erythrose in potassium phosphate buffer (ph 7.5). reaction was monitored with decreasing of nadph absorbance in od340 at 37 ˚c for 8 min by a microplate analyzer. in order to determine the activation energy (ea), activity of enzyme was measured in 4-45 ˚c and results were analyzed with kinetic software according to arrhenius equation. the best enzyme activity of er was 6.268 mu. one unit of er activity was defined as the amount of enzyme that catalyzes the oxidation of 1μmol of nadph per minute. specific activity of enzyme was equal to 3.24u/mg and finally the ea was determined to be 29.6208 kj.er specific activity in this study was lower than the only similar study that used y. lipolytica. purification, overexpression and optimizing the reaction can help to increase enzyme performance.
کلیدواژه Erythrose Reductase ,Yarrowia Lipolytica ,Enzyme Kinetics
آدرس Shahid Chamran University Of Ahvaz, Faculty Of Science, Department Of Biology, Iran, Shahid Chamran University Of Ahvaz, Faculty Of Science, Department Of Biology, Iran, Shahid Chamran University Of Ahvaz, Faculty Of Science, Department Of Biology, Iran, Shahid Chamran University Of Ahvaz, Faculty Of Veterinary Medicine, Department Of Basic Sciences, Iran
پست الکترونیکی alishrr@yahoo.com
 
   مطالعه کینتیکی اریتروز ردوکتار استخراج شده از مخمر یاررویا لیپولیتیکا  
   
Authors شهریاری علی ,قزلباش غلامرضا ,محمدی محمد ,محمدی فارسانی مسعود
Abstract    مقدمه: اریتریتول به عنوان یک شیرین کننده غیرکالری زا و فاقد آسیب رسانی به دندان، برای افراد دیابتی ایمن است. هم فرآیندهای میکروبی و هم شیمیایی را می توان برای تولید اریتریتول به کار برد اما فرآیندهای شیمیایی به خاطر بهره وری پایین به مرحله صنعتی شدن نرسیده اند. ;Moniliella tomentosa, Aureobasidium sp وYarrowia lipolytica ;تولید کنندگان صنعتی اریتریتول هستند. اریتروز ردوکتاز آنزیمی کلیدی در بیوسنتز اریتریتول است که مرحله نهایی را در این مسیر کاتالیز می کند.;;روش کار: عصاره آنزیمی از یاروویا لیپولیتیکا به کمک سایش با دانه های شیشه ای با قطر 0.5 میلی مولار به دست آمد و فعالیت آنزیمی با استفاده از 10 میکرولیتر عصاره انزیمی و 7.5 میکرولیتر NADPH و 12 میلی مولار دیاریتروز در بافر پتاسیم فسفات 50 میلی مولار انجام شد.;واکنش با کاهش جذب NADPH در طولموج 340 نانومتر و دمای 37 درجه سانتی گراد به مدت 10 دقیقه و توسط دستگاه میکروپلیت آنالایزر بررسی شد. شرایط واکنش بهینه شد و تاثر دما و pH بر فعالیت آنزیمی بدست آمد;نهایتا سنجش فعالیت آنزیمی انجام شد.;نتایج: بهترین فعالیت آنزیمی در pH برابر 3 و دمای 28 درجه سانتی گراد بدست آمد و پارامترهای کینتیکی مثل Km و Vmax به ترتیب برابر 3.254 mM and 4.362 U/mg protein به دست آمد;بحث: به نظر می رسد که فعالیت بهتر آنزیم در pHهای اسیدی می تواند به دلیل پدیده ی تیتر بالای اریتریتول باشد. به این دلیل که در این مطالعه از عصاره خام آنیمی استفاده شده است پیشنهاد می دهیم که تخلیص ، بیان بالاو بهینه سازی واکنش می تواند به افزایش عملکرد آنزیمی کمک کرده و نتایج بهتر حاصل شود
Keywords
 
 

Copyright 2023
Islamic World Science Citation Center
All Rights Reserved