بررسی تنظیم میزان بیان oct4b1 به عنوان یک فاکتور کلیدی در تعیین حساسیت متفاوت سلول‌های نرمال و سلول‌های سرطانی پستان به کورکومین

زمینه و هدف: نقش مهم و حیاتی در عود مجدد تومور، سلول‌های آغازگر تومور (tics) هستند. oct4 ژنی است که محصول آن می‌تواند خواص مضری از جمله خود نوسازی، ظرفیت مزانشیمی اپیتلیال و مقاومت دارویی را به tics اختصاص می‌دهد. oct4، sox2 و nanog نیز دو ژن اساسی هستند که علاوه بر oct4 در سلول‌های بنیادی تنظیم می‌شوند. از سوی دیگر، سلول‌های بنیادی طبیعی در برابر داروهای گیاهی مختلف مانند کورکومین مقاومت بیشتری دارند. بر این اساس هدف اصلی ما در این مطالعه بررسی تغییر بیان ژن‌های مذکور پس از درمان با کورکومین در سلول‌های سرطانی پستان، سلول‌های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان انسان (hbm-mscs) و سلول‌های فیبروبلاست غیر توموری (hsfpi3) است.روش بررسی: تست mtt و annexinv/pi برای محاسبه غلظت موثر کورکومین انجام شد. برای ارزیابی سطح بیان oct4 و nanog، روش real-time pcr مورد استفاده قرار گرفت؛ از این تست برای تعیین میزان تغییر بیان mrna ژن‌های مذکور در سلول‌های mda-mb231، hbm-mscs و hsfpi3 پس از تیمار با کورکومین استفاده شد.یافته‌ها: نانوکورکومین در غلظت μm 17.5 باعث القای 50 درصد مرگ در سلول‌های سرطانی mda-mb231 پس از 24 و 36 ساعت شد. تیمار سلول‌هایسلول‌های نرمال hbm-msc با این غلظت و در زمان‌های گفته شده به طور میانگین به ترتیب %4.39 و 7.19% و در hsfpi3 به طور میانگین 10.41% و 11.03%گزارش شد. پس از 36 ساعت تیمار با dnc، بیان mrnaی oct4-b1 در هر دو سلول طبیعی در مقایسه با نمونه‌های تیمار نشده به طور قابل توجهی افزایش یافت. در سلول‌های hsfpi3 بیان mrnaی نانوگ پس از این تیمار افزایش یافت. پس از تیمار سلول‌های mda-mb231 با dnc، میزان بیان ژن‌های oct4-b1 و nanog به ترتیب به طور میانگین 0.7 و 0.54کاهش یافت.نتیجه‌گیری: سلول‌های غیر توموری در مقایسه با سلول‌های سرطانی به درمان کورکومین مقاوم تر هستند. این حداقل تا حدی به دلیل الگوی بیان متفاوت ژنها در این سلولهاست. به نظر می‌رسد نشانگرهای پرتوانی شامل oct4-b1 و nanog نقش مهمی در مقاومت این سلول‌هایسلول‌های غیر توموری به کورکومین دارند.

oct4b1 dysregulation is a key factor in different sensitivity of normal cells and breast cancer cells to the curcumin

introduction: the crucial and vital player in the tumor recurrence is the tumor initiating cells (tics). oct4 is widely appreciated non-cell surface for tics, dedicates detrimental properties to these cells including self-renewal, epithelial mesenchymal capacity, and drug resistance. oct4 and its partners sox2 and nanog are up-regulated in stem cells; on the other hand, normal stem cells are more resistant to various herbal remedies like curcumin. based on these facts our main aim in this study was to investigate the alteration of the mentioned genes expression after curcumin treatment in breast cancer cell, human bone marrow mesenchymal stem cells (hbm-mscs) and non-tumor fibroblast cells (hsfpi3). methods: mtt assay and annexinv/pi were performed to calculate the effective concentration of curcumin. to assess the expression level of oct4 and nanog, real-time pcr performed to quantify the alteration of the mrna expression of the mentioned genes after treatment in mda-mb231, hbm-mscs, and hsfpi3.results: curcumin could not induce significant apoptosis in hbm-mscs and hsfpi3 even after 24-and36-hours treatment in a toxic concentration for cancerous cells. after 36 hours treatment with dnc, the mrna expression of oct4-b1 in both normal cells enhanced significantly compared with the untreated samples. in hsfpi3 cells nanog mrna expression increased either after this treatment.  the expression of both genes decreased in the mda-mb231 after treatment with dnc.conclusion: non-tumor cells are more resistant to the curcumin treatment compared with the cancerous cells. this is at least partially due to the different expression pattern results in these cells post treatment with this reagent. pluripotent markers including oct4-b1 and nanog are proposed to play important role in this non-tumor cells curcumin resistance.