بررسی اثر مهاری mirna145 بر میزان بیان pdl1 در سلول‌ های سرطانی پستان

مقدمه:pdl1 (programmed cell death ligand 1) به عنوان یکی از مهم­ترین مولکول های کنترل کننده سیستم ایمنی در سرطان پستان به شمار می­آید و نقش مهمی در سرکوب سیستم ایمنی علیه سلول های توموری دارد. کنترل بیان pdl1 در سطح mrna با استفاده از mirna‏های مهارکننده این پروتئین از اهمیت خاصی برخوردار است. در این مطالعه، با توجه به نقش احتمالی سرکوب کنندگی تومور mirna145 در سرطان پستان، مشارکت این mirna در کاهش بیان pdl1 در سلول های سرطانی پستان بررسی شده است. روش بررسی: ابتدا هدف گیری mirna145 بر روی3’utr ژن pdl1 با استفاده از نرم افزارهای بیوانفورماتیک و سپس با روش سنجش دوگانه لوسیفراز تایید شد. میزان بیان 145mirna در رده های سرطانی پستان نسبت به رده غیرسرطانی پستان اندازه ­گیری شد. پس از ترانسفکشن 145mirna به درون رده های سلولی سرطان پستان، جهت بررسی اثر 145mirna بر میزان بیان pdl1، روش qrtpcr مورد استفاده قرار گرفت. یافته ‏ها: در مطالعه حاضر، با استفاده از نرم افزارهای بیوانفورماتیک و سنجش لوسیفراز دوگانه، منطقه 3’utr ژن pd‐l1 به عنوان یک هدف برای mirna‐145 شناسایی و تایید شد. متعاقباً، نتایج ما نشان داد که کاهش بیان mirna145 در سلول های رده سرطان پستان با افزایش بیان pdl1 ارتباط مستقیم دارد )0457/0,pvalue= 6175/0.(r = همچنین افزایش بیان mirna145 در سلول های رده سرطان پستان mdamb231، bt549 و mcf7، بیان pdl1 را به میزان قابل توجهی (به ترتیب 212/0± 983/0، 03/0± 784/0و 02/0± 083/0) کاهش داده است. نتیجه گیری: یافته های ما نشان می دهد که mirna145 با هدف­گیری مسیر pd1/pdl1 و کاهش بیان pdl1، ممکن است بتواند به عنوان یک عامل درمانی برای جلوگیری از پیشرفت سرطان پستان باشد.

Inhibitory Effect of miRNA145 on PDL1 Expression in Breast Cancer Cell Line

Introduction: PDL1 is one of the most important immune control molecules in breast cancer and plays an important role in suppressing the immune system against tumor cells. Controlling the expression of PDL1 at mRNA level using miRNA inhibitors could be helpful strategy for cancer treatment. In this study, considering the possible role of miR145 as a tumor suppression in breast cancer, its involvement in reducing PDL1 expression in breast cancer cell lines has been investigated.Methods: First, the targeting of miRNA145 on 3 ’UTR of PDL1 gene was confirmed using bioinformatics software and then by luciferase dual reporter assay. The expression level of miRNA145 was measured in breast cancer cell lines compared to normal line. After transfection of miRNA145 into breast cancer cell lines, qRTPCR was used to evaluate the effect of miRNA145 on PDL1 expression.Results: we showed that decreased expression of miRNA145 in breast cancer cell lines was directly related to increased PDL1 expression (r= 0.6175, P value₌0.0457). In addition, increased expression of miRNA145 in breast cancer cell lines MDAMB231, BT549 and MCF7 significantly reduced PDL1 expression (1.938±0.212, 1.784±0.03 and 0.083±0.02 respectively).Conclusion: Our findings suggest that miRNA145, by targeting the PD1/PDL1 pathway and reducing PDL1 expression, may be a therapeutic agent to prevent the progression of breast cancer.