|
|
|
|
بهینه‌سازی انتقال ژن به عدس (lens culinaris medik.) با استفاده از آگروباکتریوم
|
|
|
|
|
|
|
|
نویسنده
|
ذاکر تولایی فاطمه ,باقری عبدالرضا ,قره یاضی بهزاد ,شارما کایران کمار
|
|
منبع
|
پژوهش هاي حبوبات ايران - 1396 - دوره : 8 - شماره : 2 - صفحه:84 -95
|
|
چکیده
|
عدس از جمله حبوبات مهم در ایران است که با توجه به وقوع تنش‌های مختلف در مناطق کشت آن در کشور، اصلاح آن جهت افزایش تحمل به تنش‌های زیستی و غیرزیستی از اهمیت بسزایی برخوردار است. در این زمینه، کارآیی استفاده از فناوری‌های نوین از جمله کشت این‌ویترو و انتقال ژن، قابل‌توجه می‌باشد. در این مطالعه بهینه‌سازی انتقال ژن به عدس با استفاده از ژن گزارشگر gus با واسطه اگروباکتریوم تومیفاشینس انجام شد. در این پژوهش اثر عواملی مانند نوع ریزنمونه، آنتی‌بیوتیک مورد استفاده، غلظت باکتری، مدت‌زمان کشت مشترک، تاثیر استوسرینگون، بر موفقیت تراریزش بررسی شدند. نتایج پژوهش نشان داد که ریزنمونه لپه شاخه‌دارشده روی محیط کشت دارای سیتوکنین پس از حذف سرشاخه‌ها یک ریزنمونه خوب برای فرایند انتقال ژن می‌باشد. غلظت پنج میلی‌گرم بر لیتر هیگرومایسین بهترین محیط انتخابی برای شاخه‌های تراریخته شناخته شد. غلظت چهار میلی‌لیتر از کشت شبانه باکتری در 25میلی‌لیتر محیط کشت مایع و مدت‌زمان 72ساعت کشت مشترک شرایط مناسب را برای انتقال ژن فراهم کرد. استفاده از استوسرینگون بر نتایج بی‌تاثیر بود. پس از کشت مشترک، شاخه‌زایی ریزنمونه‌ها روی محیط کشت انتخابی، ریشه‌زایی، سازگاری و انتقال به گلخانه انجام شد. آزمون هیستوشیمیایی gus در مرحله قبل از ریشه‌زایی بیان ژن gus را تایید نمود. پس از انتقال گیاهچه‌‌ها به گلخانه تایید حضور ژن gus با استفاده از واکنش زنجیره‌ای پلیمراز(pcr) روی نمونه‌های برگی انجام شد. امید است، نتایج این پژوهش برای اصلاح عدس از طریق مهندسی ژنتیک و همچنین استفاده از عدس به‌عنوان میزبان برای تولید ترکیبات دارویی مفید واقع شود.
|
|
کلیدواژه
|
باززایی، ژن gus، عدس (lens culinaris medik.)، گیاه تراریخته، مهندسی ژنتیک
|
|
آدرس
|
مجتمع آموزشعالی شیروان, ایران, دانشگاه فردوسی مشهد, دانشکده کشاورزی, پژوهشکده علوم گیاهی, ایران, پژوهشگاه بیوتکنولوژی کشاورزی ایران, ایران, انستیتو تحقیقات بین المللی محصولات نیمه گرمسیری(icrisat), هند
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Optimization of genetic transformation in Lentil (Lens culinaris Medik.) using Agrobacterium tumefaciens
|
|
|
|
|
Authors
|
zaker tavallaie Fatemeh ,Bagheri Abdorreza ,Ghareyazi Behzad ,Sharma Kiran Komar
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|