اثر فراکسیون ‌های اتیل استات و ان بوتانول عصاره گیاه غافث (arimonia eupatoria) بر ترمیم نخاع و بیان ژن های کاسپاز 3 و 9 پس از کمپرسیون عصب سیاتیک در رت

ژن کاسپاز 3 در پیشرفت دژنراسیون و کاسپاز 9 در روندهای آپوپتوزی، نکروزی و مرگ لیزوزومی نقش دارند و پس از آسیب عصب، میزان بیان آنها تغییر می کند. این پژوهش با هدف تعیین اثرات نوروپروتکتیوی عصاره هیدروالکلی و فراکسیون های گیاه غافث (agrimonia eupatoria) بر دانسیته نورونی و تغییر بیان ژن های کاسپاز 3 و 9 پس از کمپرسیون عصب سیاتیک در رت انجام شد. 36 سر رت نر نژاد ویستار به شش گروه شش تایی شامل: کنترل، کمپرسیون، تیمار a (کمپرسیون+ عصاره هیدروالکلی با دوز 75 میلی‌گرم/کیلوگرم)، تیمار b (کمپرسیون+ فراکسیون اتیل استات با دوز75 میلی‌گرم/کیلوگرم)، تیمار c (کمپرسیون+ فراکسیون ان بوتانول با دوز 75 میلی‌گرم/کیلوگرم) و تیمار d (کمپرسیون+ فاز آبی با دوز 75 میلی‌گرم/کیلوگرم) تقسیم شدند. در گروه کنترل پس از بیهوش کردن رت ها، عضله در محل عصب سیاتیک بدون آسیب عصب شکافته شد و در گروه کمپرسیون و گروه‌های تیمار عصب سیاتیک پای راست به مدت 30 ثانیه تحت کمپرسیون قرار گرفت. اولین تزریق عصاره به صورت داخل صفاقی بلافاصله بعد از کمپرسیون عصب و دومین تزریق 7 روز بعد انجام شد. بعد از 28 روز، رت ها تحت روش پرفیوژن قرار گرفته و از نخاع قسمت کمری نمونه برداری گردید. لام ها با آبی تولوئیدین رنگ آمیزی شده، دانسیته نورونی به روش دایسکتور و متد استریولوژی محاسبه و نتایج توسط آنالیز t-test و anova مقایسه شدند. از قطعات نخاعی نمونه برداری شد، total rna استخراج و cdna سنتز گردید و تغییرات بیان ژن های کاسپاز 3 و 9 در نمونه ها بررسی شد. نتایج نشان داد که دانسیته نورونی در تمام گروه‌های تیمار افزایش معنی داری نسبت به گروه کمپرسیون دارد (0.001 > p) و در گروه ان بوتانول بیشتر از سایر گروه‌ها است. بیان ژن کاسپاز 3 و 9 در تمام گروه‌های تیمار نسبت به گروه کمپرسیون کاهش یافت (0.01 > p). عصاره این گیاه بدلیل داشتن ترکیباتی مانند توکوفرول که اثرات آنتی اکسیدانی و ضد آپوپتوزی دارد می تواند در ترمیم سیستم عصبی موثر باشد.

the effect of ethyl acetate and n-butanol fractions of extract of arimonia eupatoria on the repair of spinal cord and the expression of caspase 3 and 9 genes after sciatic nerve compression in rats

caspase 3 gene plays a role in the progression of degeneration and caspase 9 in apoptotic, necrotic, and lysosomal deaths, and after the nerve damage, this study aimed to determine the neuroprotective effects of hydro alcoholic extract and fractions of agrimonia eupatoria plant on neuron density and the change in the expression of caspase 3 and 9 genes 36 male wister rats weighing were divided to 6 groups including control, compression, treatment a (compression + hydro alcoholic extract in dose of 75 mg/kg), treatment b (compression + ethyl acetate fraction in dose of 75 mg/kg dose), treatment c (compression +n butanol fraction in dose of 75 mg/kg) and treatment d (compression + aqueous phase with dose of 75 mg/kg). in the control group, after anesthetizing of the rats, the muscle at the sciatic nerve site was split without nerve damage and in compression group and treatment groups; sciatic nerve of the right leg was subjected to compression for thirty seconds. the first intraperitoneal injection of the extract was performed immediately after compression of the nerve and the second injection was performed 7 days later. after twenty-eight days, the rats were subjected to the perfusion method and samples were taken from the lumbar spinal cord. slides were stained with toluidine blue, the neuron density was measured using a dissector method and the stereology method and the results were compared by t-test and anova analysis. spinal cord samples were taken, total rna extracted, and cdna was synthesized, and then, and the expression changes of caspase 3 and 9 genes in the samples were investigated. the results showed that neuronal density increased significantly in all treatment groups compared to the compression group (p < 0.001) and it is more in the n-butanol group than the other groups. the gene expression of caspase 3 and 9 decreased in all treatment groups compared with compression group (p < 0.01). the extract of this plant can be effective in repairing the nervous system due to the presence of compounds such as tocopherol, which has anti-oxidant and anti-apoptotic effects.