بررسی اثرات ضد التهابی پپتیدهای زیست فعال اسپیرولینا پلاتنسیس استخراج شده توسط آنزیم سیستئین پروتئاز حیوانی موش‌های Balb/C

بیماری التهابی روده، بیماری مزمن دستگاه گوارش است و درمان قطعی دارویی برای این بیماری وجود ندارد. اگر از پیشرفت این بیماری جلوگیری نشود موجب بروز بیماری های خطرناکی از جمله سرطان روده بزرگ می شود. سیانوباکتری اسپیرولینا یک منبع منحصر به فرد از مواد زیست فعال طبیعی با خواص بالقوه در سلامت زایی می باشد. هدف مطالعه حاضر، تهیه آنزیم سیستئین پروتئاز میوه کیوی و بهینه سازی استخراج پپتید زیست فعال اسپیرولینا پلاتنسیس توسط آنزیم سیستئین پروتئاز و بررسی خاصیت ضدالتهابی پپتیدهای استخراج شده اسپیرولینا در موش های مبتلا به التهاب روده می باشد. بدین منظور از روش سطح پاسخ rsm عملکرد بهینه آنزیم مشخص شد و پپتیدهای استخراج شده در خشک کن انجمادی خشک و برای تعیین وزن مولکولی پپتید، الکتروفورز sds page space گردید. پپتیدهای حاصل در دمای 20 درجه نگهداری شد. جهت بررسی اثرات ضدالتهابی در 28 سر موش balb/c با اسیداستیک چهار درصد  التهاب القا گردید. پس از اطمینان از التهاب پپتید با غلظت (3.8  میلی گرم بر کیلوگرم) و داروی امپرازول به عنوان کنترل مثبت و آب به عنوان کنترل منفی به موش های balb/c مبتلا به زخم روده، گاواژ انجام شد. نتایج نشان داد وزن مولکولی آنزیم سیستئین پروتئاز 24 کیلودالتون است و بهینه شرایط هیدرولیز آنزیمی سیستئین پروتئاز در دمای 60 درجه سانتی گراد، زمان 210دقیقه و ph 7.5 بدست آمد. نتایج بافت شناسی وجود التهاب در گروه شاهد و در موش هایی که پپتید با غلظت 3.8 میلی گرم بر کیلوگرم بافت روده ترمیم، کریپت و مخاط روده در طول درمان کاملاً بازسازی شده بود را نشان داد. آنزیم آلکالین فسفاتاز در موش هایی که پپتید دریافت کردند پایین آمده که نشانه بهبود التهاب در موش ها است. در نتیجه پپتیدهای زیست فعال اسپیرولینا توانسته التهاب موجود در روده موش ها را درمان کند.

Evaluation of Antiinflammatory Effects of Bioactive Peptides of Spirulina Platensis Extracted by Animal Cysteine Protease Enzyme in Mice Balb/C

Inflammatory bowel disease is a chronic disease of the gastrointestinal tract with no definitive drug treatment. If the disease is not prevented, it may lead to dangerous diseases such as colon cancer; thus, it is important to treat or provide medication for this disease. Extensive tests performed on Spirulina show that this cyanobacterium is a unique source of natural bioactive substances with potential healing properties. The aim of this study was to prepare kiwifruit cysteine ​​protease enzyme and optimize the extraction of the bioactive peptide Spirulina platensis by cysteine ​​protease as well as evaluating the antiinflammatory properties of spirulinaextracted peptides in mice with intestinal inflammation. To this end, the optimal performance of the enzyme was determined by the RSM response surface methodology and the peptides extracted in the freeze dryer were SDS page space to determine the molecular weight of the peptide by electrophoresis. The resulting peptides were stored at 20°C. To evaluate the antiinflammatory effects in 28Balb/C mice, inflammation was induced with 4% acetic acid. After confirming the inflammation of the peptide with a concentration of 3.8 mg/kg and omeprazole as positive control and water as negative control, Balb/C mice with intestinal ulcers were gavaged. The results showed that the molecular weight of cysteine ​​protease enzyme is 24 kDa and the optimal enzyme hydrolysis conditions of cysteine ​​protease were obtained at 60 °C, 210 min, and pH 7.5. Histological results showed the presence of inflammation in the control group and in mice whose peptide at a concentration of 3.8 (mg/kg) had completely regenerated intestinal tissue, crypt, and intestinal mucosa during treatment. The enzyme alkaline phosphatase is low in mice receiving the peptide, indicating improved inflammation in mice. As a result, the bioactive spirulina peptides were able to treat inflammation in the intestines of mice.