بررسی نوع ریز‌نمونه بذری و منبع کربن در بهینه‌سازی تولید پینه‌های مناسب فستوکای بلند در شرایط درون شیشه‌ای

فستوکای بلند (festuca arundinacea schreb.) یک چمن پوششی فصل خنک چندساله است که دارای گرده‌افشانی آزاد می‌باشد. ریزافزایی و انتقال ژن به گونه‌های تک لپه مانند فستوکای بلند همواره با راندمان پایینی همراه بوده است. بنابراین بررسی اثر نوع ریز نمونه بذری و منبع کربن به کار رفته در محیط کشت می‌تواند از طریق بهینه سازی تولید پینه مناسب، برای انتقال ژن به این گیاه سودمند باشد. پس از گندزدایی سطحی بذر فستوکای بلند با الکل و کلراکس، انواع ریز نمونه‌های بذری دارای جنین و فاقد جنین برای ارزیابی قدرت تولید پینه در محیط ms کشت شدند.همچنین استفاده از شکر معمولی‌، مالتوز و نسبت برابری از مالتوز و شکر معمولی نیز به عنوان منبع کربن در قالب یک طرح آزمایشی کاملا تصادفی با 3 تکرار به عنوان تیمارهای منبع کربن مورد بررسی قرار گرفتند. در پایان، پینه‌های جنین‌زای القاء شده روی محیط دارای 10 میلی‌گرم در لیتر 2,4-d و 0.05 میلی‌گرم در لیتر ba مورد باززایی قرار گرفتند. نتایج بررسی نوع ریز نمونه بذری به طور آشکار حاکی از ضرورت وجود جنین در ریز نمونه برای القاء پینه دارد. ریز نمونه‌های فاقد جنین که به صورت طولی و عرضی برش خورده بودند قادر به القاء پینه نبودند. بررسی سه منبع کربن متفاوت نشان می‌دهد که مالتوز و شکر معمولی به طور جداگانه میزان کلروفیل کل و کارتنوئید را در برگ گیاهان باززایی شده بهبود می‌بخشند در حالی که استفاده همزمان از شکر معمولی و مالتوز چنین اثری را نشان نداد. براساس نتایج بدست آمده از این آزمایش، استفاده از روش برش عرضی به همراه جنین در بذر فستوکای بلند و استفاده از مالتوز تنها در محیط کشت بافت این گیاه به ترتیب بهترین ریز نمونه برای کشت بافتو بهترین منبع کربن برای القاء تولید پینه و پرآوری شاخساره در این گیاه است.

investigating the type of seed explant and carbon source on optimization of in vitro production of festuca araundinacea callus

tall fescue is an open pollinated cool season turf grass. micropropagation and genetic transformation of monocot species have always experienced low genetic transformation efficiency. therefore, evaluation of explant types and carbon source in media, likely through callus optimization would lead to the genetic transformation improvement which is the goal of this experiment. after surface sterilization of tall fescue seeds, different seed explants with or without embryo, have used to evaluate callus induction ability. normal sugar, maltose and equal amount of sugar and maltose were also used as a different source of carbon in a completely randomized design with three replications. finally, embryogenic calli, induced to produce shoots in ms media supplemented with 10 mg/l 2,4-d and 0.05 mg/l ba. the presence of embryo on explant is a necessity for callus induction. explant without embryos which were cut differently failed to produce callus. the assessment of three carbon source during the course of multiplication under in vitro culture indicated that sucrose and maltose significantly improved total chlorophyll and carotenoid content in regenerated shoots while ms media with equal amount of both aforesaid carbon sources were not effective. the results gained in the present experiment indicated that embryo-contained cross section of seeds and using maltose was the best explant and the best carbon source for callus induction and shoot proliferation respectively.