|
|
|
|
مطالعه اثرات پاتولوژیک آلودگی با قارچ کاندیدا آلبیکنس (candida albicans) در همکشتی سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی با سلول های سرتولی گوسفند
|
|
|
|
|
|
|
|
نویسنده
|
شهبازفر امیرعلی ,اسد پور رضا ,تیر انداز مهداد ,کتیرایی فرزاد
|
|
منبع
|
آسيب شناسي درمانگاهي دامپزشكي - 1403 - دوره : 18 - شماره : 2 - صفحه:143 -158
|
|
چکیده
|
کاندیدا آلبیکنس (candida albicans) عامل کاندیدیاز گوسفند، میتواند با ایجاد التهاب بیضه و التهاب اپیدیدیم در روند طبیعی قدرت باروری قوچها اختلال ایجاد کند. سلولهای اسپرماتوگونی بیضه در طول حیات مرتباً تقسیم شده و با تولید اسپرماتوزوئیدها قدرت باروری جنس نر را حفظ میکنند. آسیبهای وارد شده به بافت بیضه با تحت تاثیر قرار دادن سلولهای بنیادی، باروری جنس نر را متاثر میسازند. در مطالعه حاضر، جداسازی، خالصسازی و کشت سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی بیضهء گوسفند به همراه سلولهای سرتولی، در محیط کشتdmem-f12 (dulbecco's modified eagle medium/nutrient mixture f-12) انجام گرفت. ماهیت سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی و سرتولی توسط تکنیک ایمینوسیتوشیمی تایید شد. سپس سلولها با قارچ کاندیدا آلبیکنس در 5 گروه با دزهای متفاوت قارچی آلوده شدند و یک گروه نیز به عنوان گروه شاهد در نظر گرفته شد و هیچ قارچی به آن اضافه نشد. بعد از رشد قارچها در مدت 24 ساعت، سلولها به همراه قارچهای رشد کرده توسط متانول فیکس شده و با رنگ هماتوکسیلین- ائوزین رنگآمیزی شدند. اثر سیتوپاتیک قارچ کاندیدا آلبیکنس از طریق بررسیهای ریختشناسی و اندازهگیری شاخصهای آسیب سلولی شامل لاکتات دهیدروژناز و مالون دیآلدئید بعد از طی مدت 24 ساعت مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج نشان داد که کاندیدا آلبیکنس روی سلولهای سرتولی و سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی در طی مدت 24 ساعت اثر سیتوپاتیکی را با وارد نمودن آسیب سلولی و رشد سریع در محیط، ایجاد میکند و میزان آسیب سلولی و شاخصهای آسیب سلولی با افزایش دوز قارچ در گروههای مختلف، افزایش می یابد. به همین دلیل باید در نظر داشت تاحد ممکن از رشد قارچ در محیط های کشت جلوگیری شده و از تحقیقات روی محیط های کشت قارچ زده اکیداً خودداری گردد.
|
|
کلیدواژه
|
سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی، سلولهای سرتولی ، سیتوپاتی، کاندیدا آلبیکنس
|
|
آدرس
|
دانشگاه تبریز, دانشکده دامپزشکی, گروه پاتوبیولوژی, ایران, دانشگاه تبریز, دانشکده دامپزشکی, گروه علوم درمانگاهی, ایران, دانشگاه تبریز, دانشکده دامپزشکی, ایران, دانشگاه تبریز, دانشکده دامپزشکی, گروه پاتوبیولوژی, ایران
|
|
پست الکترونیکی
|
f.katiraee@tabrizu.ac.ir
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
pathologic effects of candida albicans on co-culture of sheep spermatogonia stem cells and sertoli cells
|
|
|
|
|
Authors
|
shabazfar amir ali ,asadpour reza ,tirandaz mahdad ,katiraee farzad
|
|
Abstract
|
candida albicans is the cause of candidiasis in sheep .candida albicans can cause fertility disorder in ram with epididymitis and orchitis. spermatogonia keep proliferating during sexual life of male animals and maintain male fertility by producing spermatozoa. testicular tissue damage affects germ cells and consequently influences male fertility. in the present study, we isolated and purified and then co-cultured spermatogonial stem cells with sertoli cells in dmem-f12 culture media. spermatogonia stem cells and sertoli cells were identified by vimentin and oct-4 immunocytochemical staining method, respectively. the cells were infected with candida albicans in five groups with different doses and one group was considered as control without fungal infection. after fungal growth within 24 hours, the cells and fungus were fixed with methanol and stained with hematoxylin and eosin. the cytopathic effects of candida albicans were evaluated by morphological changes and cell injury biomarkers (ldh and mda measurement) after 24 hours. the results indicated that candida albicans had cytopathic effect on spermatogonia stem cells and sertoli cells during 24 hours infection. candida exerts its damages by its cytopathic effects and its rapid growth in culture, and these damages were dose dependent. therefore, fungus infection of culture media should be prevented and research on infected culture media should be strictly avoided.
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|