ارزیابی مقایسه‎ای ایمنی‌زایی واکسن کونژوگه پنوموکوک در دو سویه موش آزمایشگاهی balb/c و dba/2: مطالعه پیش‌بالینی

استرپتوکوک پنومونیه به راحتی از انسان به حیوانات منتقل شده و باعث پنومونی به‌خصوص در اسب می‌شود. واکسیناسیون گسترده انسان از انتقال این بیماری به میزبان اسب جلوگیری می‌کند. ایمنی‌زایی یک واکسن توسط روش‌های مختلف ارزیابی می‌شود. هدف این مطالعه، طراحی آزمونی جهت سنجش ایمنی‌زایی واکسن کونژوگه پنوموکوک به‌صورت بخشی از مطالعات پیش‌بالینی تولید واکسن است. پس از کشت استرپتوکوک پنومونیه سروتیپ 19f در محیط بلاد آگار، کلونی‌های به‌دست آمده با استفاده از رنگ فلورسنس نشاندار شدند. از طرفی سرم موش‌های balb/c و dba/2 که با 3 دز واکسن کونژگه پنوموکوک ایمن شده بودند، به منظور تعیین آنتی‌بادی‌هایی با خاصیت بیگانه‌خواری علیه استرپتوکوک پنومونیه جمع‌آوری شد. پس از مجاورت رقت‌های سرمی با باکتری نشان‌دار، توانایی بیگانه‌خواری باکتری‌ها توسط اپسونین‌های موجود در سرم (اپسونوفاگوسیتوز) با اضافه کردن ماکروفاژ موشی توسط فلوسایتومتری خوانش شد. در هر دو سویه موش با کاهش رقت سرمی درصد سلول هایی در سرم که باکتری را فاگوسیتوز کردند کاهش پیدا کرد. تیتر اپسونوفاگوسیتیک در موش  balb/c 128 و در موش dba/2 64 گزارش گردید. از طرفی نتایج فلوسایتومتری با نتایج آزمون شمارش دستی کلونی‌های زنده تفاوت معنی‌داری داشت (r = 0.89, p≤0.001). طبق نتایج مطالعه حاضر مشخص شد سویه موش balb/c میزبان بهتری به منظور انجام تعیین کارایی واکسن است. از طرفی استفاده از روش فلوسایتومتری مزایای بیشتری نسبت به روش سنجش دستی دارد. در نتیجه نتایج این مطالعه ما را یک قدم دیگر به تولید واکسن موثر نزدیک‌تر می‌کند.

comparative evaluation of immunogenicity of pneumococcal conjugate vaccine in two strains of balb/c and dba/2 mice :preclinical study

streptococcus pneumoniae is easily transmitted from humans to animals and causes pneumonia, especially in horses. extensive human vaccination prevents the transmission of the disease to the horse host. the immunogenicity of a vaccine is evaluated by various methods. the aim of this study was to design a test to evaluate the immunogenicity of pneumococcal conjugate vaccine as part of pre-clinical studies of vaccine production. after culturing streptococcus pneumoniae serotype 19f in blood agar medium, the obtained colonies were labeled using fluorescence dye. on the other hand, the serum of balb/c and dba/2 mice immunized with pneumococcal conjugate vaccine was collected to determine antibodies with phagocytosis properties against streptococcus pneumoniae. after proximity of serum dilutions with labeled bacteria, the ability of bacteria to phagocytosis by serum opsonins (opsonophagocytosis) was read by adding mouse macrophage cells by flow cytometry. in both strains, the percentage of cells in the serum that phagocytosed the bacterium decreased with decreasing serum dilution. opsonophagocytic titers were reported 128 in balb/c mice and 64 in dba/2 mice. on the other hand, flow cytometry results were significantly different from the results of manual colony count test (r = 0.89, p≤0.001). according to the results of the present study, the balb/c strain of mice was a better host to determine the efficacy of the vaccine. also, using flow cytometry method has more advantages than manual assay method. as a result, the data of this study bring us one step closer to producing an effective vaccine.