مقایسه روش‌های جداسازی، مولکولی و سرولوژی جهت شناسایی کبوتران مشکوک به بیماری سل پرندگان

بیماری سل یکی از قدیمی ترین بیماری های عفونی مشترک بین انسان و دام است. اهمیت بیماری سل پرندگان و خطر روزافزون گسترش این بیماری در جوامع انسانی انگیزه ای مضاعف جهت تشخیص سریع تر این بیماری فراهم نموده است. مایکوباکتریوم اویوم تحت گونه اویوم مهم ترین عامل بیماری سل در پرندگان می باشد. نمونه برداری این تحقیق در سال 13971396 انجام گرفت. بر اساس نشانه های بالینی 101 کبوتر مشکوک به بیماری سل از گله های مختلف انتخاب شدند. ابتدا از کبوتران به منظور تهیه سرم، خون گیری انجام شد و پس از آسان کشی، با انجام کالبدگشایی، به منظور جداسازی عامل با روش کشت و انجام آزمایشات مولکولی نمونه های بافتی جمع آوری شد. کشت نمونه ها در سه محیط اختصاصی لونشتاینجانسون گلیسیرین دار و لونشتاینجانسون پیروات دار و هرولداگ انجام شد. نمونه ها با استفاده از پرایمرهای 16s rrna، is1245 و is901 مورد بررسی مولکولی قرار گرفتند. با طراحی سیستم الایزا نمونه های سرم از نظر وجود آنتی بادی علیه مایکوباکتریوم اویوم بررسی شدند. با انجام کشت و انجام آزمایشات مولکولی 39 جدایه از مایکوباکتریوم اویوم تحت گونه اویوم جدا شد و در آزمایش سیستم الایزای طراحی شده 13 مورد آلودگی این کبوتران به مایکوباکتریوم اویوم تحت گونه اویوم تشخیص داده شد. بر اساس نتایج به دست آمده حساسیت روش کشت و pcr نسبت به روش سیستم طراحی شده الایزا بالاتر بود اما با توجه به ارتباط معنی دار این سه روش با هم و نیز با توجه به ساده، سریع، ارزان و نسبتا غیر تهاجمی بودن روش الایزا به نظر می رسد می توان از سیستم الایزا جهت غربال گری گله ها در مراحل اولیه بیماری استفاده نمود.

Comparison of molecular and serological isolation methods to identify pigeons suspected of having avian tuberculosis

Tuberculosis is one of the oldest infectious zoonotic diseases. The importance of avian tuberculosis and the growing risk of the disease in human societies have provided a double incentive for rapid diagnosis of the disease. Mycobacterium avium subsp. avium is the most important cause of disease in poultry. Sampling for the present research was done during 20182019. Based on clinical signs and poor physical condition, 101 pigeons suspected of having tuberculosis were selected from different herds. First, blood samples were taken from pigeons for serum preparation. Then pigeons were euthanized and necropsy was performed and tissue samples were taken for culture and molecular tests. The samples were cultured in three specific media: LunsteinJohnson with glycerin, LunsteinJohnson with pyruvate and Heroldegg. Molecular analysis of samples was conducted using 16S rRNA, IS1245, and IS901 primers. Serum samples were analyzed for antibodies against Mycobacterium avium using a specifically designed ELISA system. Based on culture and molecular identification, 39 isolates from Mycobacterium avium subsp. avium were isolated. Contamination of 13 pigeons with Mycobacterium avium subsp. avium was detected using the specifically designed ELISA system. According to the results, the sensitivity of the culture and PCR methods was higher than the specifically designed ELISA system. However, due to the significant relationship between these three methods, it seems that the ELISA system can be used to screen flocks in the early stages of the disease.