اثر سانتریفیوژ و کلسترول بارگذاری‌شده با سیکلودکسترین در رقیق‌کننده لیسیتین سویا بر‌کیفیت اسپرم قوچ قزل بعد از فرآیند ذوب

حفظ تحرک و زنده مانی اسپرم قوچ هنگام استفاده از اسپرم منجمد شده برای به دست آوردن میزان آبستنی بالا مهم است. هدف از این مطالعه بررسی اثر سانتریفیوژ و کلسترول بارگذاری شده با سیکلودکسترین در لیسیتین سویا به عنوان رقیق کننده، بر کیفیت اسپرم بعد از فرایند انجمادذوب بود. نمونه‌های منی از 5 راس قوچ قزل 54 ساله به مدت 3 هفته جمع‌آوری شدند. بعد از ارزیابی اولیه و تائید کیفیت، نمونه‌ها به 8 قسمت مساوی تقسیم شدند. پلاسمای منی 4 نمونه در دمای 30 درجه سلسیوس به وسیله سانتریفیوژ حذف گردید. نمونه‌های باقی مانده بدون سانتریفیوژ به وسیله بافر تریس و غلظت‌های مختلف کلسترول لودشده با سیکلودکسترین (0، 0.75، 1.5 و 3 میلی‌گرم در 10^8×1.2 اسپرم) و 7 درصد گلیسرول مشابه با گروه اول رقیق‌سازی شدند. سپس نمونه‌ها تا دمای 5 درجه سلسیوس سردسازی شده و در پایوت‌های 0.25 میلی‌لیتری ذخیره شدند. نتایج نشان‌دهنده بهبود معنی‌دار پارامترهای تحرک ‌کل و پیش‌رونده، سرعت در مسیر مستقیم، سرعت در مسیر منحنی، تناوب عرضی زنش، یکپارچگی غشای ‌آکروزومی، یکپارچگی غشای‌پلاسمایی، ظرفیت تام آنتی اکسیدانی و فعالیت آنزیم های سوپراکسید دیسموتاز، گلوتاتیون ‌پراکسیداز و مالون دی‌آلدئید، بعد از ذوب در گروه دریافت کننده 1.5 میلی‌گرم سیکلودکسترین در مقایسه با سایر گروه ها بود (0.05>p). همچنین تحرک‌ کل و پیش‌رونده، سرعت در مسیر منحنی، یکپارچگی غشای پلاسمایی، ظرفیت تام آنتی‌اکسیدانی و فعالیت آنزیم های سوپراکسید دیسموتاز و گلوتاتیون ‌پراکسیداز به طور معنی‌داری در گروه بدون سانتریفیوژ نسبت به گروه با سانتریفیوژ، بالاتر بود (0.05>p ). به طورکلی نتایج نشان داد که افزودن 1.5 میلی‌گرم کلسترول بارگذاری شده با سیکلودکسترین باعث بهبود اغلب پارامترهای مورد ارزیابی نسبت به سایر گروه‌ها شد.

Effects of centrifugation and cholesterolloaded with cyclodextrin in the soybean lecithin based extender on the quality of the postthaw sperm of Ghezel ram

When using frozenthawed semen, maintaining the motility and viability of ram sperm is important for achieving high pregnancy rates. The goal of this research was to clearly elucidate the effects of centrifugation and cholesterolloaded cyclodextrin (CLC) in a soy lecithinbased extender on postthaw ram sperm quality. Sperm samples were collected from 5 Ghezel rams with the age of 45 years for 3 weeks. After the initial assessment, the approved semen samples were combined and divided into 8 equal parts. Four samples were combined at 30˚C and the seminal plasma was then removed by centrifugation. The semen from the other four samples was not centrifuged and was diluted with Tris buffer plus different concentrations of CLC (0, 0.75, 1.5 and 3 mg/ 1.2×108 spermatozoa) and 7% glycerol, similar to the first group. The samples were then cooled to 5˚C and frozen in 0.25 ml straws. After thawing, total motility (TM) and progressive motility (PM), straight line velocity (VSL), curvilinear velocity (VCL), beat cross frequency (BCF), total antioxidant capacity (TAC), superoxide dismutase (SOD), malondialdehyde (MDA), glutathione peroxidase (GPX), the integrity of the acrosome membrane and the integrity of the plasma membrane were significantly (p<0.05) higher in the 1.5 mg CLC group compared to the other groups. Also TM, PM, VCL, TAC, SOD, GPX and plasma membrane was significantly (p<0.05) higher in the group without centrifugation than in the centrifugation group. Overall, the results suggested that addition of 1.5 mg CLC improves most of the sperm parameters measured in vitro in comparison to other groups.