تشخیص آلودگی گاومیش‌های‌ بومی به تیلریا اورینتالیس در استان آذربایجان‌غربی با استفاده از روش‌های مولکولی و میکروسکوپی

عامل ایجادکننده بیماری تیلریوز در گاوها، انگل تک یاخته ای خونی داخل سلولی اجباری به نام تیلریا آنولاتا بوده که باعث کم خونی شدید، خیز شدید ریه ها و به خصوص در دام های غیربومی موجب مرگ سریع می شود.هدف این مطالعه، تعیین آلودگی گاومیش های بومی و ارتباط آن با عوامل محیطی در چهار شهراستان آذربایجان غربی با روش های میکروسکوپی و مولکولی بود. به طور تصادفی 291 نمونه خون از گاومیش های منطقه از اسفند 1392 تا تیر 1393 جمع آوری گردید. روش های pcrمستقیم و pcrsemi-nested نیز برای ارزیابی dnaگونه های انگل تیلریا با استفاده از جفت پرایمرهای ویژه جزء 18-srrnaمورد استفاده قرار گرفتند. در بررسی میکروسکوپی، حضور این انگل در 4 راس گاومیش (1.37 درصد از گاومیش های مورد آزمایش) تایید گردید. بررسی های مولکولی نیز نشان داد که نمونه های خون در 4 مورد از 291 راس گاومیش (1.37 درصد از موارد) به انگل تیلریا آنولاتا (theileriaannulata) آلوده بودند.همچنین این مطالعه نشان داد که دو راس گاومیش ماده بالغ (0.68 درصد از گاومیش های مورد آزمایش) به طور هم زمان به گونه تیلریا اورینتالیس (theileria orientalis) هم آلوده بوده اند. شیوع ظاهری و واقعی آلودگی گاومیش به تیلریا آنولاتادر روش مولکولی به ترتیب 1.37 و 1 درصد به دست آمد. شانس آلودگی به گونه هایتیلریا آنولاتا و تیلریا اورینتالیس برابر بود. شیوع مولکولی تیلریا آنولاتا در شهرهای ارومیه و سلماس به ترتیب 2.2 و 2.3 درصد بود که اختلاف معنی داری با هم داشتند (p<0/05). شیوع مولکولی تیلریا اورینتالیس در شهر ارومیه 2.2 درصد برآورد شد. این مطالعه برای اولین بار تایید کرد که انگل تیلریا اورینتالیس در گاومیش های بومی شهر ارومیه ایران وجود دارد.

Detection of Theileria orientalis infection in indigenous buffaloes of West Azarbaijan province using molecular and microscopic tests

The causative agent of bovine theileriosis is obligatory intracellular protozoa called T. annulata which results in severe anemia, severe pulmonary edema and rapid death in nonnative animals. The present study was aimed to detect the current state of Theileria infection in indigenous buffaloes and its association with environmental factors in four cities of West Azarbaijan province using microscopic tests (blood smear evaluation) and molecular assays. Blood samples were randomly collected from 291 buffaloes in the region, during March to July 2014. Direct and seminested PCR techniques were used to detect DNA of Theileria spp. using specific pair primer 18SrRNA. In the microscopic assay method, presence of this parasite in four (1.37%) buffaloes was approved. The molecular assays revealed that 4 out of 291 animals (1.37%) were infected by T. annulata. Also the present study showed that two female adult buffaloes (0.68%) were simultaneously infected by T. annulata and T. orientalis. Apparent and real prevalence of infection of buffaloes to T. annulata in the molecular method were 1.37 and 1 percent respectively. The chance of infection by T. annulata and T. orientalis were equal. Molecular prevalence of T. annulata in Urmia and Salmas were 2.2 and 2.3 percent respectively (p<0.05). Molecular prevalence of T. orientalisin Urmia was 2.2%. This is the first study to indicate the presence of infection with T. orientalis in indigenous buffaloes of Urmia city in Iran.