evaluation of resistance to fluoroquinolones and determination of mutations in gyra and parc genes in escherichia coli isolated from raw milk of dairy cows with coliform mastitis in khorasan razavi province, iran

The present study was performed to assess the resistance profile to fluoroquinolone and to determine mutations in gyra and parc genes of escherichia coli in bovine coliform mastitis. fluoroquinolones (norfloxacin (nor), ciprofloxacin (cip), enrofloxacin (nfx), levofloxacin (lev), and ofloxacin (ofl) were tested against e. coli isolates, isolated from bovine mastitis (100 milk samples) by disk diffusion method. to determine the extent of gyra and parc mutations associated with fluoroquinolone resistance in e. coli, two isolates with the highest resistance to each fluoroquinolone were submitted for the amplification and sequencing of the quinolone resistance-determining regions (qrdrs) of gyra and parc genes. the disk diffusion method indicated that e. coli isolates had the highest intermediate resistance to ofl (16.7%), followed by nfx and nor (15%), while they had low resistance to cip and lev (3.33%). a few silent mutations in gyra (in codons 91, 100, 111, 131, 132) and in parc (in codons 91, 157, 159) were detected in qrdrs, and mutations in nucleotides 65, 80, and 83 in gyra, and 195, 209, 212 in parc were detected in the other isolate. these results showed an intermediate rate of resistance to fluoroquinolones in e. coli isolates from raw milk of cows with coliform mastitis

ارزیابی مقاومت به فلوروکینولون‌ها و تعیین جهش‌ها در ژن های gyrA و parC در باکتری اشریشیاکلای جداشده از شیر خام گاو های شیری مبتلا به ورم پستان کلی فرمی در استان خراسان رضوی، ایران

جچکیده مطالعه حاضر برای ارزیابی پروفایل مقاومت به فلوروکینولون‌ها و جهش در ناحیه مقاوم به کینولون‌ها در ژن‌های gyrA و parC اشریشیاکلای در ورم پستان کلی فرمی گاو صورت گرفت. با روش دیسک دیفیوژن، مقاومت به فلوروکینولون‌ها (نورفلوکساسین، سیپروفلوکساسین، انروفلوکساسین، لووفلوکساسین و افلوکساسین) در اشریشیاکلای جدا شده از (100 نمونه شیر) گاوهای مبتلا به ورم پستان سنجیده شد. برای تعیین جهش‌های وابسته به مقاومت به فلوروکینولون‌ها در ژن‌های gyrA و parC اشریشیاکلای، یکی از جدایه‌ها که بیشترین مقاومت نسبی را به فلوروکینولون‌ها داشت برای تکثیر و توالی‌یابی ناحیه مقاوم به کینولون‌ها در ژن‌هایgyrA و parC مورد استفاده قرار گرفت. روش دیسک دیفیوژن نشان داد جدایه‌های اشریشیاکلای بیشترین مقاومت نسبی را به افلوکساسین (16.7%) و سپس به انروفلوکساسین و نورفلوکساسین (15%) داشتند درحالیکه مقاومت نسبی کمی به سیپروفلوکساسین و لووفلوکساسین (3.33%) داشتند. جهش خاموش در ناحیه مقاوم به کینولون‌ها، در کدون‌های 91 و 100 ژن gyrA و در کدون 91 ژن parC یافت شد. این نتایج نشان داد که میزان مقاومت نسبی باکتری اشریشیاکلای جدا شده از شیر خام گاوهای مبتلا به ورم پستان کلی فرمی نسبت به فلوروکینولون‌ها، بسیار پایین می‌باشد. هم‌چنین جهش‌های خاموش در ژن‌های gyrA و parC وجود داشت، بنابراین، این آنتی بیوتیک‌ها هنوز در درمان گاوهای مبتلا به ورم پستان کلی فرمی موثر هستند.