بررسی مولکولی ژن فلاژلین flab2 در سرووارهای بیماریزای لپتوسپیرا

لپتوسپیروزیس یک بیماری عفونی مشترک بین انسان و حیوانات می باشد که توسط لپتوسپیراهای بیماریزا ایجاد می گردد. flab2 پروتئین تاژک پری پلاسمی می باشد که در طی عفونت در میزبان بیان می شوند. این پروتئین در بین تمام سرووارهای بیماریزای لپتوسپیرا حفظ شده است. هدف از این تحقیق بررسی مولکولی ژن کد کننده فلاژلین flab2 به روش pcr در سرووارهای بیماریزای لپتوسپیرا در ایران می باشد. در این تحقیق 20 سرووار بیماریزا و دو سرووار غیر بیماریزای لپتوسپیرا استفاده گردید. 22 سرووار فوق در محیط کشت اختصاصی emjh کشت داده شدند و dna ژنومیک با استفاده از روش استاندارد فنل کلروفرم تخلیص گردید. جهت تکثیر ژن flab2 پرایمرهای اختصاصی طراحی و حساسیت و ویژگی آن در pcr مورد بررسی قرار گرفت. نتایج pcr روی ژن flab2 با تولید قطعه ای به طول 1050 جفت باز نشان داد که در همه 20 سرووار بیماری زای لپتوسپیرا ژن flab2 وجود دارد، این ژن در لپتوسپیراهای غیربیماریزای l. biflexa مشاهده نگردید. یافته ها نشان می دهد که ژن کدکننده flab2 فقط در سرووارهای بیماری زا وجود دارد. بنابراین شناسایی مولکولی ژن flab2 برای تشخیص سرووارهای بیماری زا از غیربیماری زا لپتوسپیرا از اهمیت بالایی برخوردار است.

molecular evaluation of flagellin flab2 gene in pathogenic leptospira serovars

leptospirosis is a common zoonotic infectious disease, that cause by pathogenic leptospires.flab2 is a periplasmic flagellum protein that is expressed during infection in the host. thisprotein is conserved among all pathogenic leptospiral serovars. the aims of this study wasmolecular evalution of the gene encoding flab2 protein by pcr method in pathogenicleptospira serovars in iran. in this study, 20 pathogenic leptospira serovars and two nonpathogenicleptospira serovars were used. all 22 leptospira serovars were cultured into theselective medium emjh and genomic dna was purified using standard phenol-chloroformmethod. specific primers were designed for amplification of flab2 gene and its sensitivity andspecificity were evaluated by pcr. the results of pcr product of flab2 gene was 1050 bp andit was observed that all 20 pathogenic leptospira serovars contained the flab2 gene. this genewas not amplified from two non-pathogenic l. biflexa. the results of this study showed that thegene flab2 gene was present only in pathogenic serovars. therefore, molecularcharacterization of flab2 gene is important for detection of pathogenic serovars from nonpathogenicleptospira serovars.