خالص سازی لاکتوفرین جداشده از شیرگاو بوسیله کرماتوگرافی تمایل

اکتوفرین یک پروتئین چند عملکردی با خاصیت ضد میکروبی است که خواص متنوع و شگفت آوری دارد و می تواند کاندید مناسبی جهت کاربردهای بالینی و تجاری باشد. در بررسی حاضر ابتدا لاکتوفرین توسط کروماتوگرافی تعویض یونی با استفاده از cm sephadex c 50 خالص و جهت تایید خالص سازی ، از آزمایش های sds-page و نیز عدم ایجاد رنگ در حضور تترامتیل بنزدین استفاده گردید. در ادامه خرگوش سفید نر نیوزلندی با g/ml 120 لاکتوفرین و با استفاده از ادجوانت کامل و ناقص فروند به مدت 6 هفته ، ایمن شد و پس از جدا سازی سرم با آزمایش های دات بلات و الایزا آنتی بادی اختصاصی تایید گردید جهت خالص سازی آنتی بادی اختصاصی از روش رسوب دهی با سولفات آمونیوم 40 درصد استفاده گردید که پس از تایید به سفارز فعال شده با سیانوژن متصل گردید، قسمت آب پنیری آغوز گاو از ستون کروماتوگرافی تمایلی عبور داده شد. بمنظور خالص نمودن ،لاکتوفرین برای تشکیل کمپلکسی از آنتی ژن آنتی بادی واکنش داده و در نهایت سایر ترکیباتی که اتصال نیافته اند شسته و خارج شدند. خالص سازی لاکتوفرین تایید و غلظت آن با آزمایش برادفورد محاسبه گردید. نتایج تحقیق نشان داد که روش ایمن ،نمودن جهت تولید آنتی بادی اختصاصی بر علیه لاکتوفرین روشی مناسب بوده و خالص سازی لاکتوفرین از شیر گاو با استفاده از کروماتوگرافی تمایلی دارای بازده 64 درصد می باشد.