شناسایی ترکیبات آنتوسیانینی در 10 رقم انگور (vitis vinifera l.) با روش hplc- dad

سابقه و هدف: انگور یا تاک (vitis vinifera l.) منبع مهمی از ترکیبات فنولی و آنتوسیانینی بوده و این ترکیبات خاصیت آنتی‌اکسیدانی و ضدسرطانی قوی دارند. آنتوسیانین‌ها در درجه اول توسط عوامل ژنتیکی تعیین می‌شوند. رنگ پوست میوه در انگور، یک عامل مهم و موثر در شناسایی ژرم‌پلاسم غنی این گیاه و تحت تاثیر مقدار آنتوسیانین است. از آنجایی که حدود 250 رقم از مجموع 800 -1000 ژنوتیپ انگور در ایران رشد می‌کنند، مطالعه ترکیبات آنتوسیانینی در منابع ژرم‌پلاسمی ضروری است. این مطالعه جهت بررسی تنوع ترکیبات پلی‌فنولی و آنتوسیانینی در 10 رقم رنگی انگور انجام شد.مواد و روش‌ها: در این پژوهش، ارقام فلیم، کریمسون، رد گلاب، صاحبی قوچان، قره‌شیره، صاحبی ارومیه، سیاه قره‌باغ، ریش‌بابا، فلیم سیدلس و لعل بیدانه مورد بررسی قرار گرفتند. نمونه‌های انگور رنگی (قرمز و سیاه) زمانی برداشت شدند که مقدار قند آنها در محدوده 19 -22 بود و رنگ‌گیری کامل داشتند. میزان فنول کل در گوشت میوه با روش فولین سیوکالتو انجام شد و از اسید گالیک به عنوان استاندارد استفاده گردید. اندازه‌گیری فلاونوئید کل با روش کالری‌متری آلومینیوم کلراید و تعیین مقدار آنتوسیانین پوست حبه به روش وانگر (1979) با کمک دستگاه اسپکتروفتومتر در طول موج 760 نانومتر انجام شد. اندازه‌گیری ترکیبات آنتوسیانینی در پوست حبه با روش hplc dad انجام شد. تجزیه واریانس کلیه صفات مورفولوژیکی توسط نرم‌افزار ibm spss 26 و با استفاده از anova یک طرفه انجام شد. همبستگی ژنوتیپ‌ها و تجزیه pca و نقشه پراکندگی بر طبق pc1/pc2، با استفاده از نرم‌افزار آماری spss رسم شد. مقادیر فاصله بر اساس روش اقلیدسی محاسبه و دندروگرام با استفاده از روش upgma توسط نرم‌افزار آماری ncss12 تهیه شد.یافته‌ها: نتایج نشان داد که بیشترین غلظت فنول کل به ترتیب مربوط به ژنوتیپ کریمسون (16.94 میلی‌گرم اسید گالیک بر 100 گرم)، رد گلوب (13.74 میلی‌گرم اسید گالیک بر 100 گرم) و فلیم (13.58 میلی‌گرم اسید گالیک بر 100 گرم) بود. در صورتی که، بیشترین مقدار فلاونوئید کل مربوط به رقم فلیم (36.47 میلی‌گرم بر 100 گرم) و رد گلوب (10.05 میلی‌گرم بر 100 گرم) و بیشترین مقدار آنتوسیانین کل در رقم سیاه قره‌باغ (6.56 میلی‌گرم بر کیلوگرم) و قره‌شیره (6.09 میلی‌گرم بر کیلوگرم) مشاهده شد. در بین ارقام مورد بررسی، کمترین میزان فنول کل در ژنوتیپ صاحبی قوچان با 2.88 میلی‌گرم اسید گالیک بر 100 گرم، کمترین میزان فلاونوئید کل در ژنوتیپ قره‌شیره با 4.56 و همینطور کمترین میزان آنتوسیانین کل در رقم فیلم با 0.23 میلی‌گرم بر کیلوگرم دیده شد. مشتقات مالویدین (کفوییل گلوکوزاید) و نیز پئونیدین و سیانیدین در 100% نمونه‌ها وجود داشتند. غلظت مالویدین در ژنوتیپ فلیم و رد گلوب در حد جزیی بود و در صاحبی ارومیه و لعل بیدانه مشاهده نشد؛ همچنین، ترکیب پلارگونیدین و مشتقات آن شناسایی نشدند. بیشترین غلظت آنتوسیانین منفرد مربوط به پئونیدین و مالویدین بود. نتایج همچنین نشان داد که بیشترین همبستگی مثبت و معنی‌دار بین دلفینیدین 6 استیل گلوکوزاید و سیانیدین 6 استیل گلوکوزاید (0.99 =r) بود. مالویدین بیشترین همبستگی را با دلفیدین و پتونیدین نشان داد. بر اساس دندروگرام تجزیه خوشه‌ای، 10 ژنوتیپ مورد مطالعه از نظر صفات آنتوسیانینی به دو گروه اصلی تقسیم شدند. گروه اول شامل دو رقم سیاه قره‌باغ و قره‌شیره بود که از گروه دوم فاصله داشتند.نتیجه‌گیری کلی: ارقام مورد مطالعه از نظر ترکیبات منفرد آنتوسیانینی و نیز میزان فنول، فلاونوئید و آنتوسیانین کل تفاوت‌های معنی‌داری نشان دادند. ترکیب پئونیدین و مالویدین بیشترین غلظت را در این ژنوتیپ‌ها داشتند. ژنوتیپ سیاه قره‌باغ و قره‌شیره بیشترین آنتوسیانین کل را نشان دادند.در رقم سیاه قره‌باغ، بیشترین غلظت پئونیدین (54.08 میلی‌گرم بر کیلوگرم) و در رقم قره‌شیره بیشترین غلظت مالویدین (42.78 میلی‌گرم بر کیلوگرم وزن خشک) شناسایی شدند. این دو رقم با فاصله از سایر ژنوتیپ‌ها در گروه مجزایی قرار گرفتند.

identification of anthocyanin compounds in 10 grape cultivars (vitis vinifera l) by hplc dad method

introduction and objectivesgrapes are a significant source of phenolic compounds, genetic factors primarily determine anthocyanins, and in grapes, skin color is a critical and influential factor in the large germplasm of grapes. since about 250 cultivars of 800 1000 grape cultivars are grown in iran, studying anthocyanin compounds in the available germplasm resources is crucial. therefore, this study was carried out to investigate the profile and diversity of different polyphenolic and anthocyanin compounds in some colored grapevine cultivars (v. vinifera l). material and methodsin this study the cultivars flame, crimson, red globe, sahebi ghoochan, ghare shire, sahebi urmia, syah ghare bagh, rish baba, flame seedless and lale bidane were investigated. the amount of phenol in the pulp was measured by the folin ciocalteu method, and total flavonoids were measured by aluminum chloride calorimetry method. total anthocyanin was measured with a spectrophotometer at 760 nm. the evaluation of the individual anthocyanin compounds was done by hplc dad. analysis of variance for all morphological traits was performed with the software ibm spss 26 using the one way method anova. the correlation among varieties, pca analysis, and the scatter plot of the distribution according to pc1/pc2 were made with the statistical software spss. the distance values were calculated using the euclidean method, and the dendrogram was generated using the upgma method of the ncss statistical software (ncss.12).resultsthe percentage of total phenols, flavonoids, and anthocyanins in the berries of the studied cultivars were 48, 43, and 9, respectively. the results showed that the highest concentrations of total phenols were found in the cultivars “crimson” (16.94 mg gae/100 g), “red globe” (13.74 mg gae/100 g), and “flame” (13.58 mg gae/100 g). the highest content of total flavonoids was found in “flame” (36.47 mg100 g 1) and “red globe” (10.05 mg 100g 1), also the highest content of anthocyanins was found in “ghare shire”, “syah ghare bagh”, “lale bidane” and “sahebi urmia” with 6.09, 6.59, 3.58 and 2.01 mg kg 1, respectively. among the varieties studied, the lowest content of total anthocyanins, flavonoids, and phenol respectively was observed in “flame” with 0.23 mg kg 1 and “syah ghare bagh” with 5.8 mg/kg, and in “sahebi ghoochan” with 2.88 mg kg 1. the composition of pelargonidin and its derivatives was not identified. the concentration of malvidin in “flame” and “red globe” was trace and was not observed in “sahebi urmia” and “lale bidane”. the correlation results show that the highest positive and significant correlations were between delphinidin 6 acetyl glucoside and cyanidin 6 acetyl glucoside (r=0.99). malvidin showed the highest correlation with delphinidin and petunidin. according to the dendrogram of cluster analysis of ten red cultivars for anthocyanins, they were divided into two main groups. the first group consisted of the two cultivars “syah ghare bagh” and “ghare shire”, further away from the other eight cultivars of the second group. conclusionthe studied cultivars showed significant differences in the individual anthocyanin compounds and the amount of phenol, flavonoids, and total anthocyanins. according to the results, peonidin and malvidin had the highest concentrations in the studied cultivars; in “syah ghare bagh”, the highest concentration of peonidin was found at 54.08 mg kg dw 1, and in “ghare shire” malvidin with 42.78 mg kg dw 1. in addition “syah ghare bagh” and “ghare shire”’ had the highest total anthocyanin concentration. consequently, these genotypes were located in a separate group by distance from most cultivars based on cluster analyses.