توسعه و معتبرسازی روش hplc-uv برای آنالیز سولفاسالازین در پلاسما انسانی

سابقه و هدف: در این مطالعه، یک روش سریع، ساده و پیشرفته بر اساس کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا فاز معکوس (rp-hplc) برای آنالیز کمی سولفاسالازین در پلاسمای انسان توسعه داده شد. روش بررسی: سولفاسالازین با استفاده از روش ساده رسوب دهی پروتئین، بوسیله استونیتریل، از پلاسما استخراج گردید. شرایط کروماتوگرافی شامل ترکیب فاز متحرک، سرعت آن، حجم تزریق و دمای آون بهینه شد. سپس روش توسعه‌یافته بر اساس خطی بودن، انتخابی بودن، صحت، دقت، حد تشخیص و حد اندازه‌گیری معتبرسازی شد.  یافته ها: جهت بررسی سولفاسالازین از ستون c18 brisa lc2 (250 mm × 4/6 mm, 5μ) استفاده شد. شستشو در حالت ایزوکراتیک با فاز متحرکی متشکل از مخلوط استونیتریل: آمونیوم استات 10 میلی مولار با ph معادل 4/6 (70:30) و سرعت جریان 1.0 میلی لیتر در دقیقه و دمای اتاق انجام شد. شناسایی سولفاسالازین با شناساگر uv در طول موج 361 نانومتر انجام شد. نمودار کالیبراسیون سولفاسالازین در پلاسمای انسانی در محدوده 50-3/125 میکروگرم در میلی لیتر با ضریب همبستگی 0/9999

development and validation of a hplc-uv method of analysis for sulfasalazine in human plasma

background: in this study, a rapid, simple, and advanced reverse phase high-performance liquid chromatography (rp-hplc) method was developed for the quantification of sulfasalazine in human plasma. materials and methods: sulfasalazine was extracted from plasma matrices using a simple protein precipitation method by acetonitrile. chromatographic conditions were optimized (mobile phase compositon, flow rate, injection volume and temperature of the oven). the method was validated in protein precipitated human plasma for linearity, selectivity, accuracy, precision, limit of detection, limit of quantification. results: the chromatographic separation was conducted on c18 brisa lc2 column (250 mm × 4.6 mm, 5μ) using isocratic elusion with mobile phase consisting of the mixture of acetonitrile: 10mm ammonium acetate ph adjusted to 4.6 (30:70 v/v) with a flow rate of 1.0 ml/min at ambient temperature. detection was carried out by uv detector at 361 nm. calibration curves made in the human plasma were linear in the range of 3.125-50 μg/ml with the value of r2 > 0.9999. the lod and loq was 0.5 and 2.5 µg/ml, repectively.conclusion: the developed and validated hplc-uv method is suitable for accurately determining sulfasalazine levels in pharmacokinetic studies of new formulations.