مقایسه دو روش استخراج وزیکول‌های خارج سلولی از perfringens clostridium

سابقه و هدف: وزیکول‌های خارج سلولی (evs)، وزیکول‌هایی با اندازه نانو تا میکرون هستند که می‌توانند محموله‌های زیستی را حمل کنند. همه انواع سلول‌ها می‌توانند evها را ترشح کنند که مشارکت آنها در مکانیسم‌های حیاتی مختلف سلول مشاهده شده است. روش‌های مختلفی جهت جداسازی evها وجود دارد که دارای مزایا و معایبی هستند. هدف از مطالعه حاضر بررسی روش غیراولتراسانتریفیوژ و اولتراسانتریفیوژ در جداسازی evها بود. روش بررسی: در این مطالعه تجربی ازatcc13124  perfringens clostridium استفاده شد. بعد از کشت، استخراج evها با دو روش غیراولتراسانتریفیوژ و اولتراسانتریفیوژ انجام شد. برای بررسی خصوصیات شیمیایی از تعیین غلظت پروتئینی ev با استفاده از دستگاه nanodrop استفاده شد و الگوی پروتئینی ev با استفاده از تکنیک sds-page انجام شد. میکروسکوپ الکترونی عبوری(tem) جهت بررسی خصوصیات فیزیکی evها استفاده شد. یافته ها: نتایج ما نشان داد که evs جدا شده با روش اولتراسانتریفیوژ میزان پروتئین بالاتری در مقایسه با روش غیراولتراسانتریفیوژ ( به ترتیب3.17 و 1.46 میکروگرم بر میلی لیتر) داشتند. روش اولتراسانتریفیوژ نسبت به روش غیراولتراسانتریفیوژ،  evs بیشتر و بزرگتری را جدا کرده بود. همچنین، الگوی های پروتئینی evs با روش sds-page در هر دو روش مشابه بودند.نتیجه گیری: نتیجه مطالعه حاضر نشان داد که جداسازی evهای حاصل از perfringens clostridium با روش اولتراسانتریفیوژ می‌تواند روش بهینه‌تر و مقرون به صرفه‌تری نسبت به روش غیراولتراسانتریفیوژ باشد.

comparison of two extraction methods of extracellular vesicles from clostridium perfringens

background: extracellular vesicles (evs) are nano- to micron-sized vesicles with the ability to transport bioactive cargos. all types of cells have the ability to release evs, which have been demonstrated to be involved in a number of essential cell functions. there are various methods for isolating evs, each with advantages and disadvantages. the purpose of this study was to invistigate at the non-ultra centrifugation method and ultra-centrifugation method for isolating evs. materials and methods: clostridium perfringens atcc13124 was used in this experimental study. following culture, evs were extracted using two methods: non-ultra method and ultra-method. to examine chemical characteristics, the ev protein concentration was measured using a nanodrop device, and the ev protein pattern was identified using sds-page. transmission electron microscopy (tem) was utilized to examine the evs’ physical properties. results: our results showed that the evs isolated by the ultra-method had a higher protein content compared to the non-ultra method (3.17 and 1.46 mg/ml, respectively).the ultra-method isolated more and larger evs compared to the non-ultra method. also, protein patterns of the evs by sds-page method were similar in both methods.conclusion: the present study showed that the ultra-method can be a more efficient and cost-effective way for isolation evs from clostridium perfringens than the non-ultra method.