مقایسه روش سنجش atp بیولومینسانس و روش استاندارد شمارش کلنی جهت ارزیابی محصولات ب ث ژ

سابقه و هدف: روش مرسوم سنجش کارایی محصولات واکسن ب ث ژ از طریق شمارش کلونی است که بسیار کند و طاقت فرسا است. به منظور کنترل کیفی واکسن، روشی سریع جهت تخمین باسیل های زنده مورد نیاز است. atp شناساگر قابل اعتمادی برای قابلیت زنده مانی سلول است و میزان نور ساطع شده در واکنش بیولومینسانس بطور مستقیم وابسته به میزان atp باسیل ها است. در مطالعه حاضر رابطه میان دو روش فوق مورد بررسی قرار گرفت.روش بررسی: تعداد کلونی های زنده (cfu) و سیگنال بیولومینسانس (rlu) محصولات bcg به ترتیب با استفاده از روش مرسوم میکروبیولوژیک و کیت اختصاصی تعیین شد. میزان atp محصولات بر اساس میزان atp و cfu واکسن استاندارد nibsc تخمین زده شد. آنالیز رگرسیون خطی جهت تعیین میزان همبستگی دو روش با استفاده از نرم افزار graph pad prism 8.0 انجام پذیرفت. ضریب k جهت محاسبه تعداد کلونی محصولات bcg تعیین شد.یافته ها: ارتباط خطی و همبستگی قابل توجهی میان دو روش برای بالک ( 0.9874 =r2) و واکسن bcg (r2=0.9417) در مقایسه با پاستوسیس ( 0.7692 =r2) بدست آمد. ضریب k برای واکسن و بالک bcg تعیین شد که می توان از آن جهت پیش بینی و تخمین تعداد کلونی سری ساخت های جدید محصولات استفاده کرد.نتیجه گیری: این مطالعه اشاره می کند که روش بهبود یافته بیولومینسانس، روشی سریع، حساس و قابل اعتماد جهت تسریع فرایند کنترل کیفی واکسن bcg است.

comparison of the atp-bioluminescence assay and the standard colony counting method for evaluation bcg products

background: the conventional method of evaluating the efficacy of bcg vaccine products is through colony count, which is very slow and cumbersome. a rapid test for estimating viable bacilli is necessary for vaccine quality control. atp is a reliable marker for cell viability, and the amount of emitted light during bioluminescence reactions is directly proportional to the atp content of the bacilli. in this study, the correlation between these two methods was evaluated. materials and methods: cfu (colony-forming unit) value and bioluminescence signal (rlu) of bcg products were determined by microbiological conventional method and the special kit respectively. atp content of the products were estimated based on atp content and cfu value of standard nibsc vaccine. linear regression analysis were done by graph pad prism 8.0 software to determine the extent of correlation between two methods. the coefficient k was determined to calculate the cfu value of bcg products.results linear relationship and significant correlation were obtained between two methods for bcg bulk (r2= 0.9874) and vaccine (r2= 0.9417) compared to pastocys (r2= 0.7692). the coefficients k were determined for bcg and bulk vaccine (0.447 and 0.26 respectively) and can be used to predict and estimate the cfu value of new bathes of products. conclusion: the study suggests that an optimized atp bioluminescence assay is a rapid, sensitive, and reliable alternative method that can accelerate the quality control process for bcg vaccine