بررسی ایمنی همورال و سلولی پروتئین نوترکیب اتولیزین استافیلوکوکوس اورئوس در مدل موشی

سابقه و هدف: استافیلوکوکوس اورئوس کوکسی گرم مثبت و پاتوژن فرصت طلب است. با توجه به گسترش مقاومت این باکتری در برابر آنتی بیوتیک ها، یکی از مهم ترین راه های پیشگیری، استفاده از واکسن است. در این بین، پروتئین اتولیزین به عنوان یکی از مولکول های چسبندگی باکتری نقش مهمی در اتصال به سلول های میزبان و تقسیم سلولی دارد. در مطالعه حاضر نقش پروتئین اتولیزین به عنوان کاندیدای واکسن مورد بررسی قرار گرفت. روش بررسی: بعد از تولید پروتئین نوترکیب اتولیزین، 20میکروگرم rautolysin فرموله شده با ادجوانت های آلوم و مونتاناید isa266 سه بار با فواصل دو هفته ای در موش های balb/cبه صورت زیر جلدی تزریق شد. با استفاده از روش الایزای غیر مستقیم تیتر آنتی بادی توتال، ایزوتایپ های igg1، igg2 و سایتوکاین های il4 و ifn -yاندازه گیری شد. موش های آزمایشی با دوز cfu108 × 5 مورد چالش باکتریایی قرار گرفتند، سپس تعداد باکتری ها در ارگان های داخلی تعیین شد. یافته ها: ایزوتایپ آنتی بادی های igg1وigg2a در موش های واکسینه شده در مقایسه با گروه کنترل، افزایش معنی داری داشتند. همچنین سایتوکین های ifn -y و il4تفاوت معنی داری در گروه های مختلف واکسینه شده در مقایسه با گروه کنترل نشان دادند. میزان باکتری در اندام های داخلی موش های واکسینه شده 1000 بار کمتر از گروه های کنترل بود. در نهایت بقای موش های ایمن پس از چالش در مقایسه با گروه کنترل افزایش یافته بود.نتیجه گیری: نتایج به دست آمده نشان دهنده نقش اتولیزین به عنوان کاندیدای مناسب واکسن علیه عفونت استافیلوکوکی است.

Evaluation of humoral and cellular immunity of recombinant autolysin protein Staphylococcus aureus in mouse model

Background: Staphylococcal aureus is a gram positive cocci and opportunistic pathogen. Due to the spread of this bacterium to antibiotics resistance, one of the most important ways of prevention is the use of vaccines. In this respect, autolysin protein as one of the adhesion molecule of bacteria plays an important role for binding bacteria to the host cells and cell division. Herein, the role of autolysin protein was evaluated as a vaccine candidate.Materials and methods: Following preparation of recombinant autolysin, Balb/c mice were injected subcutaneously with 20 micro;g of rautolysin formulated in Montanide ISA266 and Alum adjuvants three times with two week intervals with proper control group. Total, specific isotype antibodies, IFN gamma; and IL4 cytokine were evaluated on sera by ELISA. Experimental mice were challenged with a sublethal dose of staphylococcus strains (1.5 ×108 CFU) and following that, the number of bacteria from internal organs were determined. Survival rate was recorded for 30 days.Results: Significant increase of antibody with high level of IgG1 and IgG2a isotypes was demonstrated in vaccinated mice versus the control group. Also, IFN gamma; and IL4 cytokines showed significant differences in all of the experimental vaccine groups compared to control group. The bacterial load in the internal organs from immunized mice was 1000 times less than control groups. Finally, the life span of immunized mice after bacterial challenge was extended versus control mice.Conclusion: These results may indicate the capacity of autolysin as candidate vaccine to control the staphylococcus infections.