تشخیص و ردیابی مایکوپلاسما سینوویه از مرغداری‌های صنعتی با استفاده از روش واکنش زنجیره‌ای پلیمراز بر اساس ژن Vlha

مایکوپلاسما سینوویه مهمترین عامل بیماریزا در ماکیان است و همه ساله خسارات اقتصادی قابل توجهی را متوجه صنعت طیور در ایران می سازد. مایکوپلاسما سینوویه قادر به بیان لیپوپروتیین هماگلوتینین متغیر(vlha) variable lipoprotein hemagglutinin a می باشد که نقش مهمی در ایجاد بیماری ایفا می کند. هدف اصلی این مطالعه تشخیص و شناسایی جدایه های مایکوپلاسما سینوویه بر اساس ژن vlha بود. از گله های طیور صنعتی سه استان (تهران، مرکزی و قزوین) که دارای علایم مشکوک به آلودگی بودند، توسط سوآپ های کتانی و از شکاف حلقی کامی، نای و کیسه‌های هوایی نسبت به نمونه گیری اقدام شد. در این مطالعه ضمن جداسازی و شناسایی مایکوپلاسما با استفاده از روش کشت و آزمون pcr جنس مایکوپلاسما، نسبت به آزمون pcr برای ناحیه محافظت شده ژن vlha مایکوپلاسما سینوویه نیز مبادرت گردید و بدین ترتیب علاوه بر پرایمرهای اختصاصی جنس مایکوپلاسما از جفت پرایمر مربوط به ناحیه محافظت شده انتهای آمینی ژن vlha استفاده گردید. در نتایج مشاهده شد که محصول pcr تولیدی برای پرایمرهای اختصاصی ژن vlha در نمونه های مثبت مایکوپلاسما سینوویه، 350-400 جفت بازی برای هر جدایه بر روی ژل الکتروفورز تشکیل داده شد و از بین 43 نمونه مورد مطالعه، در روش کشت، 28(65%) نمونه مثبت مشاهده گردید و در آزمون pcr جنس مایکوپلاسما، 33(76%) نمونه و همچنین 24(55%) نمونه در آزمون pcr ژن vlha مایکوپلاسما سینوویه، مثبت گزارش شدند. نتایج این مطالعه نشان می دهد که آزمون pcr در ناحیه?5 ژن vlha مایکوپلاسما سینوویه جهت شناسایی جدایه‌ها کاربردی بوده و همچنین به علت دربرداشتن نواحی ri، rii و ناحیه پلی مورفیسم riii، با کارایی و حساسیت بالا، می تواند جهت تشخیص و ردیابی گونه مایکوپلاسما سینوویه مورد استفاده قرار گیرد.