شناسایی سریع سالمونلاهای تیفوئیدی و غیرتیفوئیدی در نمونه‌های طیور صنعتی با استفاده از روش واکنش زنجیره‌ای پلی‌مراز چندگانه (multiplex-pcr)

شناسایی ‌سروتیپ‌های سالمونلا در نمونه‌های طیور صنعتی، با استفاده از روش های سنتی میکروبیولوژیکی انجام می شود که سبب مشکلاتی در تشخیص دقیق و به‌موقع آن‌ها می‌شود، اما روش های تشخیص مولکولی این مشکلات را تا حدودی رفع ‌کرده‌است. هدف از انجام مطالعه‌حاضر، ارزیابی امکان شناسائی سریع سالمونلا های تیفوئیدی و غیرتیفوئیدی در نمونه های طیور، با استفاده از روشmultiplex-pcr بود. 40 سالمونلای مربوط به نمونه های طیورصنعتی از آزمایشگاه های دامپزشکی ‌شهر تبریز تهیه‌شد. بعد از انجام آزمایشات افتراقی و سرولوژیکی لازم، از بین40جدایه مذکور، تعداد 15جدایهء سالمونلاگالیناروم، 7جدایهء سالمونلاانتریتیدیس، 2جدایهء سالمونلاتایفی موریوم و 3جدایهء سالمونلاپولوروم تشخیص داده شد. 13جدایه متعلق به سالمونلاانتریکا نبودند. در ادامه با استفاده از پرایمرهای اختصاصی، جهت تکثیر ژن های inva، rfbj، lygd، i137_08605 و  specو به‌کمک روشmultiplex-pcr ، جدایه‌های فوق از لحاظ ژنوتیپی بررسی شدند. یافته ها نشان داد که همه 27جدایه به همراه سوش‌های ‌استاندارد هر 4سروتیپ مذکور، ژن اختصاصی مشترک inva را دارا هستند. همچنین مشخص شد که ژن i137_08605 در همه جدایه ها و سوش‌های ‌استاندارد سروتیپ های سالمونلاگالیناروم و سالمونلا پولوروم‌، ژن های rfbj و lygd در همه جدایه ها و نیز سوش‌های ‌استاندارد سالمونلاانتریتیدیس و سالمونلا تایفی موریوم و ژن spec در همه جدایه های سالمونلا گالیناروم و برخی ازجدایه ها و سوش‌های ‌استاندارد سالمونلاانتریتیدیس و سالمونلاتایفی موریوم حضور دارند. به نظر می رسد روشmultiplex-pcr ، سالمونلاگالیناروم و سالمونلا پولوروم را از همدیگر و از متداول ترین سالمونلاهای غیر تیفوئیدی طیور تشخیص داد که با جلوگیری از اشاعه بیشترآن ها، سبب جلوگیری از خسارت به صنعت طیور شود.

rapid recognition of typhoid and non-typhoid salmonella in poultry samples using multiple polymerase chain reaction method (multiplex-pcr)

the salmonella serotypes are detected mainly through traditional microbiologic methods, which are associated with problems. the invention of rapid molecular detection methods has somewhat resolved these problems. this study aimed to assess the possibility of rapid detection of typhoid and non-typhoid salmonellas in poultry using the multiplex polymerase chain reaction (pcr). a total of 40 isolates of salmonella from industrial poultry were collected veterinary laboratories in tabriz, iran. after microbiological and serological tests, we confirmed that 27 out of 40 isolates belonged to the salmonella entrica species. differential tests revealed that 15, 7, 2, and 3 isolates were salmonella gallinarum, salmonella enteritidis, salmonella typhimurium, and salmonella pullorum, respectively. we then used specific primers to multiply the genes inva, rfbj, lygd, i137_08605, and spec. the 27 isolates were then genotypically analyzed through multiplex-pcr. the results showed that all 27 isolates and the standard strains of all 4 bacteria carry the inva gene, while this gene was absent in 13 non-salmonella isolates. the i137_08605 genes was present in all isolates and the standard strains of s. gallinarum and s. pullorum; the rfbj and lygd genes were present in all isolates of s. enteritidis and s. typhimurium and their standard strains; and the spec gene was present in all isolates of s. gallinarum and some isolates of s. typhimurium and s. entritidis and their standard strains. it seems that typhoid salmonellas of poultry, i.e., s. gallinarum and s. pullorum, can be discriminated from non-typhoid salmonellas through the multiplex-pcr molecular method. this can prevent further damage to the country’s poultry industry by preventing their further spread.