بررسی وجود ژن‌های مقاوم به کلسیتین(Mcr-Pmr) در کلبسیلاپنومونیه جداشده از شیر خام با روش Multiplex-Pcr

کلبسیلا پنومونیه باکتری گرم منفی روده ای است که سبب عفونت های بیمارستانی می شود. هدف از انجام این مطالعه بررسی ژنوتیپی ژن‌های مقاوم به کلسیتین (mcr-pmr) در کلبسیلا پنومونیه جداشده از شیر خام با روش multiplex-pcr است.از 220 تانک نگهداری شیر خام در مراکز نگهداری شیر در سال 1397 در تهران نمونه‌برداری صورت گرفت. سویه‌های کلبسیلا پنومونیه با استفاده از آزمون‌های روتین بیوشیمیایی و میکروبیولوژیکی استاندارد شناسایی شدند.استخراج ‏dna‏ طبق دستورالعمل کیت تجاری مرکز ملی ذخایر ژنتیکی و زیستی ایران (‏mbk0041‎‏) انجام شد. بعد از انجام آزمون ‏pcr‏ در دستگاه ترموسایکلر جهت بررسی حضور ژن‌های mcr  وpmr محصول نمونه‌ها  بر روی ژل آگارز 1% انتقال داده‌شده و با اتیدیوم‌بروماید رنگ‌آمیزی و سپس در دستگاه ژل داک موردبررسی قرار گرفت. در این مطالعه به بررسی فنوتیپی و ژنوتیپی دو ژن mcr و pmr، در 60 جدایه باکتری  کلبسیلا پنومونیه پرداخته شد. در این میان ژن mcr با فراوانی 11، (18.3%)  و ژن pmr  با فراوانی 7، (11.6 %) گزارش شد. ردیابی دو ژن موردمطالعه با روش مالتیپلکس pcr انجام شد که به نظر می‌رسد این اولین موردمطالعه بر روی شیر و بررسی دو ژن mcr، pmrباشد، که در ایران از نمونه‌های شیر جداسازی شده از تانک نگهداری شیر در دامداری‌های صنعتی از باکتری کلبسیلا پنومونیه صورت گرفته است، و دو ژن مذکور به‌عنوان مارکر اصلی شناسایی شدند.